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关于冲柱子的问题

  • MandyCheng
    2006/02/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我是液相色谱的新手,问两个很简单而我确实不知怎么做的问题。
    1.目前我用乙腈做流动相,如果我换流动相的话,比如乙酸铵-甲醇混合液,是开机排完气泡后直接调到所需流速做样,还是中间需要过渡一下?
    2.关于冲柱子的问题。看到很多朋友说用了磷酸盐后最好不要用纯水冲柱子,用10%甲醇冲二三十分钟,逐渐过渡到纯甲醇溶液。但我记得工程师培训我们的时候说可以用纯水冲洗30min,然后直接用纯甲醇冲1-2h。对于C18柱来说,到底哪种方法更可取呢?
    问题比较长,因为明天要做实验,现在实验室就一根柱子,所以只能询问的详细一点了,亟待大家的解答!谢谢!
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  • 安平

    第1楼2006/02/18

    应助达人

    尽量不要用纯水长时间冲柱子,最好加一点有机相。
    “可以”不代表长期使用没有问题。

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  • 春雨

    第2楼2006/02/19

    说的对,不过我一般的加一点酸,

    byron1111 发表:尽量不要用纯水长时间冲柱子,最好加一点有机相。
    “可以”不代表长期使用没有问题。

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  • 妮飘

    第3楼2006/02/19

    开机排完气后,最好是用你做实验的流动相先走至少半个小时,等仪器稳定后再进样比较好。
    洗柱子时纯水不要冲太长时间,最多不要超过15分钟为好。然后再用100%的甲醇冲洗至少半个小时以上。

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  • shaweinan

    第4楼2006/02/19

      将乙腈流动相换成乙酸铵-甲醇流动相中间最好过渡一下。此外在使用含有磷酸盐的流动相后,应该用含有少量有机相的水溶液长时间冲洗,冲洗时间至少半小时,因为磷酸盐在水中的溶解度很大,但在有机相中却很小,一旦在泵腔中析出就会损伤色谱泵的柱塞和柱塞密封,影响其使用寿命。

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  • 米老鼠

    第5楼2006/02/19

    要用你的流动相再平衡一会,要20倍柱体积的量吧,通常要半个小时,等基线和压力都平了你才能做。
    用磷酸盐后我觉最好拿纯水冲十分钟再用含甲醇的水冲,以免其在甲醇中析出。纯水冲10分钟对于柱子应该没有什么影响

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  • gongxh

    第6楼2006/02/19

    请问3楼"春雨":为什么要加一点酸?加哪种酸啊?

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  • liudy

    第7楼2006/02/19

    开机排完气泡后,先用你的流动相平衡系统,待基线平稳,压力稳定后再开始作样。
    用了磷酸盐后,先用纯水清洗片刻,然后逐渐过渡到100%甲醇。

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  • 左货

    第8楼2006/02/20

    第一问题:要中间过渡,先按去除乙酸铵比例的甲醇水溶液冲,再按标准流速一半冲柱,最后按标准流速稳定
    第二问题:最好不用纯水冲洗,同样用流动相比例的仅含水或者有机溶剂的溶液(不含盐、酸、离子对试剂等)冲冼,再过渡到纯溶剂冲洗。

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  • MandyCheng

    第9楼2006/02/21

    谢谢大家的回答,关于HPLC维护的知识我还是需要大量的补充

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  • yiyiwang

    第10楼2006/03/15

    以前曾提过用100%的超纯水来冲的!!但后来实验证实:不能用100%的水来冲!!最少要用含5%有机溶剂的超纯水来冲柱!!而我们室一般用10%的甲醇水

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