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新手急救！如何用液相确定待测物质？

ryoheishinya

2011/10/09

液相色谱（LC）

最近我在做维生素K3的方法验证，撇开前处理不说，用标准品上机摸上机方法，怎么也搞不出来，请各路大侠帮忙看看怎么弄。
我的条件是：

甲醇：水=98：2，进样量：20μL，柱温：27℃，流速：0.5mL/min，信号B:250nm，带宽8nm，参比：360nm，带宽100nm。标液的浓度是10ppm。

编号1为第一个峰，编号5为最后一个峰。

以下两个图是编号1峰的光谱图。

以下两个图是编号5峰的光谱图。

这个图是100ppm。

编号1峰为第一个峰，编号4峰为最后一个峰。

以下两个图是编号1峰的光谱图。

以下两个图是编号4峰的光谱图。

问题就在于：
1）如果单凭峰面积的变化来看，似乎峰1比较合理，因为两者之间的浓度理论上是相差了10倍。
2）但是，从光谱图来看，峰2在250nm处似乎比峰1吸收要厉害一点。
3）还有就是，一般色谱出峰都会有一个溶剂峰的，这些图看来，似乎没有明显的吸收倒峰。
4）我应该从哪里知道我要的维生素K3是在什么时候出峰呢？

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xizhi

第1楼2011/10/09

如果楼主那边方便的话，打个液质图谱吧，每个峰都能知道是什么

0

liufeilzu

第2楼2011/10/09

我投票选峰4，峰1很奇怪。

0

ryoheishinya

第3楼2011/10/09

能不能直接从以上信息中分析出应该选哪一个峰呢？
xizhi(xizhi) 发表:如果楼主那边方便的话，打个液质图谱吧，每个峰都能知道是什么

0

ryoheishinya

第4楼2011/10/09

但是从含量上看，为什么10ppm的峰5和100ppm的峰4相差不多呢？理论上来说，含量应该有10倍的差值啊。
其实我也觉得峰1比较可疑，但是从峰面积的数据来说，如此定量的话，很不准确。
liufeilzu(liufeilzu) 发表:我投票选峰4，峰1很奇怪。

0

zhaohua8011

第5楼2011/10/09

就目前的峰行，没法进行确认！

0

ryoheishinya

第6楼2011/10/09

那还需要什么信息才能确定呢？
zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:就目前的峰行，没法进行确认！

0

xizhi

第7楼2011/10/10

你没有给维生素K3进行定性（它在各个波长下吸收情况），并且也没有给出它与其他成分在浓度、吸收下的差异

0

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