二次制备，真的很神奇！（图文并茂的）

这是什么样品呀？ 做这个的用户有福了

要都是这样，那实验室纯化的效率就太高了～～
呵呵

身边有人问我楼主在说什么，我站住来得瑟一下：
1、哥们第一次用反相，没分开，流动线还加盐了，这个盐如果浓缩完了就是新的杂质。对不？
2、哥们又把第一次反相制备的东西收集了，其实这是一个混合物（2组分的），是吧？
3、LZ又用了HILIC色谱来分前面的2组分混合物（宣传你们家的材料的吧，你们的论坛，你们咋说都行），与反相的保留机理不同，整开了。
4、盐，磷酸盐，不保留，在死时间就流出了，所以顺道除盐了。

拍一个砖：如果是长链的离子对试剂，如SDS，LZ你咋办？

　这个解释比较好。易懂。

　楼主有点神吹。

不管神不神奇，提供了一种分离的方法。

[quote]原文由 chromkiller(chromkiller) 发表:身边有人问我楼主在说什么，我站住来得瑟一下：
1、哥们第一次用反相，没分开，流动线还加盐了，这个盐如果浓缩完了就是新的杂质。对不？
2、哥们又把第一次反相制备的东西收集了，其实这是一个混合物（2组分的），是吧？
3、LZ又用了HILIC色谱来分前面的2组分混合物（宣传你们家的材料的吧，你们的论坛，你们咋说都行），与反相的保留机理不同，整开了。
4、盐，磷酸盐，不保留，在死时间就流出了，所以顺道除盐了。

拍一个砖：如果是长链的离子对试剂，如SDS，LZ你咋办？

首先我没看懂楼主的帖子，因为不是很懂制备，我先来结砖呀，如果使用sds，可以不可以选择甲醇沉淀一下呢？

顺便在丢一砖，lz用的第一根柱子是10μ，第二次是5μ，第二根柱子分离度3.8， 是不是如果第一根柱子选择了5μ的柱子，样品就分开了呢？ 至于填料可以选择hilic的5μ呢？貌似用的仪器也不同，哪个仪器犀利呢，拉出来溜溜

建议铁柱总结一下，得出个简单明了的结论，好让我们这些做制备做的少的人学习学习

感谢哥们提出这么尖锐的问题。

1.流动相不挥发的话，浓缩完就是新的杂质，没错。
2.对，其实至少是三个杂质，还有缓冲盐；
3.HILIC的材料的确很好用的，可以试试，不是吹的；HILIC不但与反相的机理不同，与正相的机理也不同的；离子交换？有一点点，但不全是，具体，哥们搞不明白。
4.这个问题提的好，SDS或者辛烷磺酸钠，尽量不要用，如果非要用，HILIC 也可以试试；不行的话，就上阴离子交换了；
呵呵，哥们才疏学浅，瞎说了。

没有神吹，只是做得少，自我感觉很神奇罢了。