方法名称: 黄芩提取物-黄芩苷的测定-高效液相色谱法
应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定黄芩提取物中黄芩苷的含量。
本方法适用于黄芩经加工制成的提取物。
方法原理: 本品加甲醇溶解、稀释,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长280nm处检测黄芩苷的吸收值,计算出其含量。
试剂: 1.甲醇
2. 磷酸
仪器设备: 1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:甲醇 水 磷酸 =47 53 0.2
2.2检测波长:280nm
2.3柱温:室温
试样制备: 1. 称取供试品
精密称定本品10mg,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含60mg的溶液。
3.供试品溶液的制备
取本品约10mg,精密称定,置25mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,精密量取5mL,置25mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。
操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长280nm处测定黄芩苷(C21H18O11)的峰面积,计算出其含量。
参考文献: 中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p280。