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求助,HPLC上始终都有一个杂质峰!!

液相色谱(LC)


  • C18反相柱,流动相:甲醇/水 10/90

    进空白样,如果是水的空白,没有杂质峰;

    如果是甲醇的空白,有杂质;

    进了若干针甲醇,杂质峰保留时间一致,强度稍有减弱,但是始终都很大;而且,进10uL和100uL的时候,峰面积不成正比。

    单用C18柱或者保护柱,都有杂质峰;
    把两个柱子全拆了,从泵直接接dector,仍然有杂质峰,只不过出峰时间提前了。

    工程师换了needle和seal pak,杂质仍然存在。

    把流动相换作纯甲醇,冲洗管路之后再进样,无论进水空白还是其他有机溶剂空白(甲醇、THF),均能看到杂质。

    请教 HPLC大虾,到底是哪儿出了问题?
  • 该帖子已被版主-yu313加2积分,加2经验;加分理由:话题
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  • tangtang

    第1楼2012/03/10

    这个杂质峰是否影响检测?

    进样器用流动相做清洗液看看?

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  • grexx213

    第2楼2012/03/10

    不影响检测,但是图谱很难看。

    已经洗过了,没效果。

    tangtang(tangtang) 发表:这个杂质峰是否影响检测?

    进样器用流动相做清洗液看看?

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  • tangtang

    第3楼2012/03/10

    从描述看,是不是甲醇的问题?以前有没有类似的情况?

    换一瓶甲醇看看?

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  • grexx213

    第4楼2012/03/10

    呃,换过甲醇,不行。
    不知道以前 有没有,因为,一直都用水做空白。

    tangtang(tangtang) 发表:从描述看,是不是甲醇的问题?以前有没有类似的情况?

    换一瓶甲醇看看?

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  • tangtang

    第5楼2012/03/10

    把流动相换作纯甲醇,冲洗管路之后再进样,无论进水空白还是其他有机溶剂空白(甲醇、THF),均能看到杂质。
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    现在用水做空白也有了?

    grexx213(grexx213) 发表:呃,换过甲醇,不行。
    不知道以前 有没有,因为,一直都用水做空白。

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  • grexx213

    第6楼2012/03/10

    tangtang(tangtang) 发表:把流动相换作纯甲醇,冲洗管路之后再进样,无论进水空白还是其他有机溶剂空白(甲醇、THF),均能看到杂质。
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    现在用水做空白也有了?

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  • tangtang

    第7楼2012/03/10

    我倾向于认为还是甲醇。

    试试用水将整个流路清洗后看看?

    或者参考一下用30%磷酸清洗的方法,这个就比较狠了。

    grexx213(grexx213) 发表:是啊,所以很奇怪。不知道是哪里污染了。

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  • grexx213

    第8楼2012/03/10

    tangtang(tangtang) 发表:我倾向于认为还是甲醇。

    试试用水将整个流路清洗后看看?

    或者参考一下用30%磷酸清洗的方法,这个就比较狠了。

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  • tangtang

    第9楼2012/03/10

    只能是排除法,有杂质峰,说明有吸光度比较大的物质。

    或者换个波长看看?

    grexx213(grexx213) 发表:要是甲醇问题的话,为什么只有进样的时候才有杂质峰,之前调基线的时候反而看不到呢?

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  • 有水有渝

    第10楼2012/03/10

    应助达人

    如果有紫外光谱扫描仪,可以把水和甲醇都做个扫描看看。

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