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梯度洗脱时基线下漂是怎么回事?

液相色谱(LC)

  • 用的安捷伦1100配置VWD检测器。听说有机相的吸收比水相吸收强,基线往上飘,我的怎么是往下漂啊(图1)?我把A换成10%的乙腈后情况一样(图2)。是水的原因还是压力变化引起的?

    柱温:40℃;
    流速:2.0mL/min;
    检测波长:338 nm
    流动相:A: 40mM磷酸盐缓冲溶液,pH 7.8;
    B: 乙腈:甲醇:水(45:45:10,V/V/V)。

    图1


    图2

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  • 有水有渝

    第1楼2012/04/15

    应助达人

    什么色谱柱用这么高的PH,可能是没有平衡好,如果仪器在线混合没有问题的话,先试运行一个空白梯度看看。

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  • minus213

    第2楼2012/04/16

    用的是安捷伦 ZORBAX Eclipse AAA,作氨基酸用的。我上面的两个图都是空白,柱子已经平衡好了

    有水有渝(xky0230699) 发表:什么色谱柱用这么高的PH,可能是没有平衡好,如果仪器在线混合没有问题的话,先试运行一个空白梯度看看。

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  • pandora98

    第3楼2012/04/16

    磷酸盐吸收比有机相吸收更强。
    基线下降不是问题,重复性好就行

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  • 该帖子已被版主-zhaohua8011加2积分,加2经验;加分理由:说的不错
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  • minus213

    第4楼2012/04/17

    谢谢啊

    pandora98(pandora98) 发表:磷酸盐吸收比有机相吸收更强。
    基线下降不是问题,重复性好就行

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  • ligang19791117

    第5楼2012/04/17

    图谱虽然不好,但是重复性好,就能说明问题了,不是偶然的是必然的

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  • xiaowang268

    第6楼2012/04/17

    重复进样,如果重复性好,那就不是机子问题,是正常的,因为梯度就是这样的,流动相在变化,吸收差值就变化的

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  • lunanjituan

    第7楼2012/04/20

    一个通道是盐,另一个接近纯有机相,飘很正常啊

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  • dudubug

    第9楼2012/04/22

    又是缓冲盐,又梯度当然漂啊

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  • tangtang

    第10楼2012/04/22

    不走梯度的时候会不会漂?

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  • zhaohua8011

    第11楼2012/04/22

    如你已经平衡好了漂移估计是温度影响,再则不影响实验的话就无所谓

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