微生物限度检查用培养基、试液、稀释剂、指示液的配制方法

2、试液
2.1 二盐酸二甲基对苯二胺试液 取二盐酸二甲基对苯二胺0.1g，加水10ml，即得。需新鲜少量配制，于冷处避光保存，如试液变成红褐色，不可使用。
2.2 无菌对氨基苯甲酸试液 取对氨基苯甲酸0.1g，加入含10ml水的带塞试管中，121℃灭菌20分钟。
2.3 亚碲酸钠（钾）试液 取亚碲酸钠（钾）0.1g，加新鲜煮沸后冷至50℃的水10ml使溶解。
2.4 玫瑰红钠试液 取玫瑰红钠试液0.1g，加水使溶解成75ml。
2.5 无菌枸橼酸钠-氯化钠试液 取枸橼酸钠0.5g，加0.9%氯化钠溶液10ml，121℃灭菌20分钟。
2.6 草酸铵试液 取草酸铵1g，加水溶解使成100ml。
2.7 亮绿试液 取亮绿0.1g，加水100ml使溶解。
2.8 氢氧化钾试液 取氢氧化钾40g，加水溶解使成100ml。
2.9 盐酸试液 取盐酸8.4ml，加水稀释成100ml。
2.10 α-萘酚乙醇试液 取α-萘酚6.0g，加无水乙醇溶解使成100ml。
2.11 氰化钾试液 取氰化钾0.5g，加水溶解使成100ml。
2.12 氯化三苯四氮唑试液 取氯化三苯四氮唑0.1g，加水溶解使成10ml。
2.13 靛基质试液 取对二甲氨基苯甲醛5.0g，加入戊醇（或丁醇）75ml，充分振摇，使完全溶解后，再取浓盐酸25ml徐徐滴入，边加边振摇，以免骤热导致溶液色泽变深，或取对二甲氨基苯甲醛1.0g，加入95%乙醇95ml，充分振摇，使完全溶解后，取浓盐酸20ml徐徐滴入。
3、稀释剂
3.1 0.9%无菌氯化钠溶液 取氯化钠9.0g，加水溶解使成1000ml，121℃灭菌20分钟。
3.2 无菌聚山梨酯80-氯化钠溶液 取1ml聚山梨酯80，加0.9%氯化钠溶液使成100ml，121℃灭菌20分钟。
3.3 无菌磷酸盐缓冲液（PH7.2） 取磷酸氢二钠25.8g与磷酸二氢钠4.4g，加水稀释至1000ml，121℃灭菌20分钟。
4、指示液
4.1 中性红指示液 取中性红1.0g，研细，加95%乙醇60ml使溶解，再加水至100ml。
变色范围 PH6.8～8.0（红→黄）。
4.2 甲基红指示液 取甲基红0.1g，加95%乙醇300ml，使溶解后，加水至500ml，即得。
4.3 亚甲蓝指示液 取亚甲蓝0.5g，加水溶解使成100ml。
4.4 酚磺酞指示液 取亚甲蓝0.5g，加1mol/L氢氧化钠溶液2.82ml，使溶解，再加水至100ml。
变色范围 PH6.8～8.4（黄→红）。
4.5 溴甲酚紫指示液 取溴甲酚紫1.6g，加95%乙醇溶解使成100ml。
变色范围 PH5.2～6.8（黄→紫）。
4.6 溴麝香草酚蓝指示液 取溴麝香草酚蓝0.4g，加1mol/L氢氧化钠溶液0.64ml使溶解，再加水至100ml。
变色范围 PH6.0～7.6（黄→蓝）。
4.7 酸性品红指示液 取酸性品红0.5g，加水100ml使溶解，再逐渐加1mol/L氢氧化钠溶液16ml，每加1滴均应将溶液充分摇匀后再加第2滴，直至溶液呈草黄色；于沸水内保持15分钟，再静置2小时，滤过，即得。
变色范围 PH6.0～7.4（黄→红）。
4.8 曙红钠指示液 取曙红钠2.0g，加水溶解使成100ml。