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HPLC指纹图谱一定要用质谱吗?

液相色谱(LC)

  • 我想建立一植物的HPLC的指纹图谱,看了药物方面的很多都是用的高效液相-质谱出的图谱。我单位只有Agilent 1200。不知道光利用HPLC能否建立指纹图谱?如果光用HPLC是不是一定要有标准液,做指纹图谱的标准液该如何选?
    请高人指点?拜谢。
  • 该帖子已被版主-zhaohua8011加2积分,加2经验;加分理由:鼓励新人
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  • yjm368

    第1楼2012/08/29

    本人QQ:465210080.24小时恭候佳音。。。。拜谢啊

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  • 有水有渝

    第2楼2012/08/29

    应助达人

    你参考一下中药指纹图谱的建立,不一定都需要质谱。

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  • yjm368

    第3楼2012/08/29

    对啊,我就是想如果单独依靠HPLC来完成的话一定要标样,标样的选择也是很有讲究的。

    有水有渝(xky0230699) 发表:你参考一下中药指纹图谱的建立,不一定都需要质谱。

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  • guitu

    第4楼2012/08/29

    只用HPLC的话那你要保证能将样品分离出来,我看一条柱子有点困难

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  • liboygg

    第5楼2012/08/30

    这得看手头有什么设备,以及你的项目是否一定要做质谱的。光用HPLC是可以的,指纹图谱首先当然是各个峰分离度较好比较重要,对于不好分离的可以作为一个特征区域代笔一个特征。

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  • yjm368

    第6楼2012/08/30

    嗯,柱子要选好几个的。

    guitu(guitu) 发表:只用HPLC的话那你要保证能将样品分离出来,我看一条柱子有点困难

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  • yjm368

    第7楼2012/08/30

    现在实验室只有安捷伦1200的液相和紫外检测器。
    我只要做出指纹图谱,不一定要质谱。下面是我想要做的样品制备,请帮我指点一下啊。

    样品制备:

    将新鲜浒苔样品用蒸馏水冲洗干净,至于烘箱中55℃干燥24h。干燥后的浒苔样品切断粉碎、过40目筛后混合均匀,制备成浒苔粉末样品。

    准确称取0.5g浒苔粉末样品,置于100 ml具塞锥形瓶中,加入50ml正丁醇、乙醇混合液(V:V=9:1),在室温条件下超声提取60min,静置30min,过滤,取上清液于100ml旋蒸瓶中,在80℃条件下旋转蒸发至干,用乙腈溶解提取物并定容至2ml,过0.45μm微孔滤膜后作为供试品溶液。



    流动相:水(A),乙腈(B)。

    梯度洗脱

    如何选流动相?或者1%磷酸水(A),乙腈(B)(?)

    在做高效液相分析时,用流动相溶解样品是不是能适当地消除溶剂峰?

    流速、检测波长、进样量、梯度洗脱程序、流动相比例等是如何确定的?

    再有就是,单独用HPLC建立指纹图谱的时候是不是要选择好对照品,该如何选?是不是比如我要测定脂肪酸,那就选脂肪酸?


    liboygg(liboygg) 发表:这得看手头有什么设备,以及你的项目是否一定要做质谱的。光用HPLC是可以的,指纹图谱首先当然是各个峰分离度较好比较重要,对于不好分离的可以作为一个特征区域代笔一个特征。

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  • zhaohua8011

    第8楼2012/08/30

    不一定需要质谱的,关键要有指纹图谱库!

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  • yjm368

    第9楼2012/08/31

    越来越摸不着头脑了,云啊

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  • dark_wzy

    第10楼2012/09/02

    中药指纹图谱最早是用液相来做的,发展到后来才把质谱引入进来。所以,不是液相不能做指纹图谱,而是看楼主做指纹图谱的目的是什么?如果只是为了做不同药物之间的相似性,可以用紫外等检测器,如果需要对其中的某些成分进行定性,则需要用到质谱了。

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