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液相色谱图物质分不开

fenseyouyu

2012/09/23

液相色谱（LC）

各位，我周五在分析一种新产品的时候，出现了这种情况，我知道产品的原料和产品都是极性很大的物质，我开始选用三氟乙酸的水溶液和乙腈做流动相，进行梯度处理，分离效果很不好，而且两分钟就出峰了，后来我改用磷酸二氢钾的水溶液，可出峰的效果还是差不多，几乎没什么变化，还有我用的是RP18的色谱柱，应该而言，分离情况应该会挺好的，可就是这种情况，我不知道我因为峰没有分开还是物质的原因，求解

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makeawishn70

第1楼2012/09/23

极性大的用RP18保留不好，出峰较快。跑梯度都分不开，估计就分不开了。如果是疏水物质，可以用正相色谱；如果是亲水性物质，尝试一下hilic的色谱柱

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houjjun

第2楼2012/09/23

乙腈比列变小一些试一下

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秋醉虞阳

第3楼2012/09/23

三氟乙酸的水溶液和乙腈中乙腈的比例改小。不知道流速是多少

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nature2009

第4楼2012/09/23

做一针空白，排除是不是溶剂峰。如不是，减少有机相比例。或更换色谱柱，最好是适于极性物质分离的色谱柱。

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fenseyouyu

第5楼2012/09/23

用了啊！还是不行，因为我用的梯度就是调节乙腈的比例的，但是还是分不开的
houjjun(houjjun) 发表:乙腈比列变小一些试一下

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fenseyouyu

第6楼2012/09/23

还是不行的，我分别用0.02%的三氟乙酸和0.1%的三氟乙酸，都是没什么变化
秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:三氟乙酸的水溶液和乙腈中乙腈的比例改小。不知道流速是多少

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fenseyouyu

第7楼2012/09/23

至于是不是亲水性和疏水性的我还得去查查看，我也不知道，hilic的柱子我们没有，有没有相似的柱子？
makeawishn70(makeawishn70) 发表:极性大的用RP18保留不好，出峰较快。跑梯度都分不开，估计就分不开了。如果是疏水物质，可以用正相色谱；如果是亲水性物质，尝试一下hilic的色谱柱

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fenseyouyu

第8楼2012/09/23

空白做了，不是溶剂峰，分离极性的物质，我看了一下C18可以用啊，RP18不是在C18的基础上改进的嘛，应该会比C18强啊！可还是不行
nature2009(nature2009) 发表:做一针空白，排除是不是溶剂峰。如不是，减少有机相比例。或更换色谱柱，最好是适于极性物质分离的色谱柱。

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fenseyouyu

第9楼2012/09/23

流速是1.0ml/min 的流速
秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:三氟乙酸的水溶液和乙腈中乙腈的比例改小。不知道流速是多少

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秋醉虞阳

第10楼2012/09/23

一般分离不开主要也就色谱柱和流动相的问题，找合适的色谱柱和流动相或进行梯度。色谱柱柱效不好也可能导致分离效果不佳。

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