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液相柱如何清洗?

液相色谱(LC)

  • 流动相含有磷酸盐,分析完成后怎样清洗,是用纯甲醇吗?
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  • 石头记忆

    第1楼2013/02/06

    液相色谱柱的保存

    1.反相色谱柱每天实验后的保养:
    使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
    2.长期保存色谱柱:
    如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。

    色谱柱的保存方法
    A.几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗) ,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
    B.如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
    C.色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。
    D.注意溶剂的PH值,一般硅胶基质的色谱柱控制在2~8范围内。

    贴心提示:
    ①首先柱子必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。
    ②如果您使用的流动相中含有盐,请首先用高比例水冲洗(3%-5%有机相,1ml/min流速,冲洗30至40分钟),然后再用纯乙腈冲洗30分钟
    ③一定要将色谱柱的两端封严, 以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象,引起柱子结构的几何学改变,这可导致柱效的严重降低。

    不同的色谱柱,采用不同的流动相保存的,反相色谱柱,就直接用甲醇。正相色谱柱就用正已烷了,如手性手色谱柱,不同的型号,要根据柱子的要求进行存放的。

    如果长时间不用的话,最好是找个容器,用甲醇或乙腈把色谱柱浸泡起来。
    1,反相色谱柱一般都用纯乙腈饱和放置
    2,正相色谱柱用正己烷饱和放置;
    3,手性色谱柱一般用90HEX:10IPA,也有用90HEX:10EtOH的,针对柱子;
    4,反相手性色谱柱用40ACN:60H2O饱和放置;

    总之柱子要保存在溶剂中,不然柱子干了,基本就没什么用了!

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  • yzguo

    第2楼2013/02/06

    很详细,学习了,多谢!

    石头记忆(zzip203) 发表:液相色谱柱的保存

    1.反相色谱柱每天实验后的保养:
    使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
    2.长期保存色谱柱:
    如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。

    色谱柱的保存方法
    A.几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗) ,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
    B.如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
    C.色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。
    D.注意溶剂的PH值,一般硅胶基质的色谱柱控制在2~8范围内。

    贴心提示:
    ①首先柱子必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。
    ②如果您使用的流动相中含有盐,请首先用高比例水冲洗(3%-5%有机相,1ml/min流速,冲洗30至40分钟),然后再用纯乙腈冲洗30分钟
    ③一定要将色谱柱的两端封严, 以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象,引起柱子结构的几何学改变,这可导致柱效的严重降低。

    不同的色谱柱,采用不同的流动相保存的,反相色谱柱,就直接用甲醇。正相色谱柱就用正已烷了,如手性手色谱柱,不同的型号,要根据柱子的要求进行存放的。

    如果长时间不用的话,最好是找个容器,用甲醇或乙腈把色谱柱浸泡起来。
    1,反相色谱柱一般都用纯乙腈饱和放置
    2,正相色谱柱用正己烷饱和放置;
    3,手性色谱柱一般用90HEX:10IPA,也有用90HEX:10EtOH的,针对柱子;
    4,反相手性色谱柱用40ACN:60H2O饱和放置;

    总之柱子要保存在溶剂中,不然柱子干了,基本就没什么用了!

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  • trwei1982

    第3楼2013/02/08

    使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后是否可以用水冲洗?冲多久才不会导致填料塌陷?还是一定要用10%的甲醇/水冲洗?

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  • 三人行

    第4楼2013/02/08

    如果缓冲盐浓度较大,我一般先用纯水冲10分钟,再用10%的甲醇/水冲洗约30分钟,最后用甲醇冲30分钟。

    trwei1982(trwei1982) 发表:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后是否可以用水冲洗?冲多久才不会导致填料塌陷?还是一定要用10%的甲醇/水冲洗?

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  • zhx_fs_ln

    第5楼2013/02/10

    应助达人

    C18柱子最好不用纯水,不低于5%的有机相

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  • DeeperBlue

    第6楼2013/02/15

    应助达人

    缓冲盐要用高比例水相洗。不能用纯甲醇,会盐析,堵柱的。

    yzguo(yzguo) 发表:流动相含有磷酸盐,分析完成后怎样清洗,是用纯甲醇吗?

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  • gogo2007

    第7楼2013/02/15

    C18不能用纯水冲吧

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  • nixiaolong

    第8楼2013/02/16

    现在有的厂家柱子可以,这个和厂家咨询下

    gogo2007(gogo2007) 发表:C18不能用纯水冲吧

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  • tangtang

    第9楼2013/02/16

    有的色谱柱不需清洗,直接用流动相保存,根据色谱柱说明书。

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  • flyaway

    第10楼2013/02/18

    看说明书,询问生产厂家。不一定有这么绝对。

    zhx_fs_ln(zhx_fs_ln) 发表:C18柱子最好不用纯水,不低于5%的有机相

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