蔗糖酶测定方法（滴定法）

蔗糖霉（转化霉）的测定有化学法和物理法。下面主要介绍一下化学方法，化学法是用比色法或滴定法测定蔗糖水解时生成的还原己糖的量。
试验步骤：
1.称取10g过1mm筛的风干土样，置于100mL容量瓶中，加1.5mL甲苯（泥炭沼泽土壤用甲苯5mL），在室温下放置15min。
2.注入基质（20％蔗糖溶液）和磷酸盐缓冲溶液（pH5.5）各10mL。
3.培养23h后，用38摄氏度的水将瓶中混合物稀释至刻度（甲苯应浮在刻度以上），充分混合后重新置于恒温箱中。
4.再培养1h后，取20mL未过滤的透明液，测定其还原糖。
5.每组测定时，需设置无糖溶液和蔗糖溶液为对照。
6.还原糖测定步骤如下：
a.往100mL三角瓶中注入10mL菲林溶液和20mL供试溶液（泥炭沼泽土和熟化良好的土壤用甲苯5mL），并以20mL蒸馏水。
b.将以上三角瓶在沸水水浴中放置10min。
c.由水浴中取出三角瓶，于自来水流下冷至25摄氏度，再往瓶中注入3mL33％碘化钾溶液和4mL稀硫酸（1：3）。
d.用0.1mL硫代硫酸钠滴定以上混和液，应先注入0.5mL淀粉指示剂，再进行滴定至蓝色消失。
e.土壤的转化霉活性，以单位土重的0.1mol/L硫代硫酸钠毫升数（对照与试验测定之差）表示。