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关于色谱峰峰高的问题

化学药检测

  • 请教各位老师,做色谱分析时,色谱峰的峰高一般在什么范围比较合适呢?比如外标法测含量时,DAD检测器,那对照品的峰高多少合适呢?太浓了肯定不行,太稀呢?有没有谁研究过啊?药典或法规有提到过这样的问题吗?
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  • zzz23010402

    第1楼2013/08/03

    好像没有固定范围,塔板数、分离度、对称因子等合格就可以了

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  • erge

    第2楼2013/08/03

    即使这些都达到要求,峰高1000和2000测得的结果还是有差别的吧?

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  • xiaowang268

    第3楼2013/08/04

    这个主要是要在线性范围之内的

    erge(lihouquan) 发表:即使这些都达到要求,峰高1000和2000测得的结果还是有差别的吧?

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  • xiaowang268

    第4楼2013/08/04

    对于峰高,好像没有特定的要求的

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  • erge

    第5楼2013/08/05

    那如果用外标法定量每次都要做线性?

    xiaowang268(xiaowang268) 发表:这个主要是要在线性范围之内的

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  • xiaowang268

    第6楼2013/08/06

    不要的,只要检测浓度在线性范围就可以啊,线性做一次就知道了啊

    erge(lihouquan) 发表:那如果用外标法定量每次都要做线性?

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  • tianru的爸爸

    第7楼2013/08/07

    做分析,一般有两种:定量与定性。做色谱分析,同样有两种。

    色谱峰首先的作用是定性。如果是定性分析,峰高低差异不大,但如果过大或者过小,还是有问题:过大,如果干扰峰干扰要判定峰,则出现假阴性;过小,则检测不到色谱峰,同样也是假阴性。一般是要规定上样量,用体积或者某种物质的量的。

    色谱峰还有一个特性:与物质量有相关性,这个是用于定量的基础。做定量分析,则在方法开发时,要做方法学验证,其中有标准曲线范围,这里规定了上限和下限。如果被检样品中目的物质含量过高或者过低,则响应值/色谱峰高/色谱峰面积会超出这个标准曲线的上下限,则无法计算,需要重新处理样品,如稀释或者浓缩。一般过低,就不再处理,直接报“NA”或者未检出。

    erge(lihouquan) 发表:请教各位老师,做色谱分析时,色谱峰的峰高一般在什么范围比较合适呢?比如外标法测含量时,DAD检测器,那对照品的峰高多少合适呢?太浓了肯定不行,太稀呢?有没有谁研究过啊?药典或法规有提到过这样的问题吗?

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  • erge

    第8楼2013/08/07

    那做个线性就可以了?

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  • tianru的爸爸

    第9楼2013/08/08

    在确定方法时是要做方法学验证的;

    在定量方法学验证时,线性范围是必须要做的,但并不只做这一个,还有其它。

    erge(lihouquan) 发表:那做个线性就可以了?

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  • zhoujin83

    第10楼2013/08/08

    做含量时,不光是要在线性范围内。因为含量方法一般出峰都比较快(相对于有关物质方法),所以有时候和有些杂质的分离度可能不是特别好,如果峰比较高的话就可能包含了一些小峰进去,同时为了保证峰面积的精密度,一般含量方法的峰高在400mAU,面积3000左右。
    所以,含量,包括光学异构分析方法一般选择高波长,为的是屏蔽高波长下没有吸收的物质的干扰。

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