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黄曲霉毒素回收率不稳定

液相色谱（LC）

  • 我们实验室在摸黄曲霉毒素的方法，但是，从82% 88% 90% 118% 还有 百分之十几的！方法是称4g油，加标（甲醇溶解），加乙腈/水=84/16，漩涡，离心，然后取两毫升，加25mlPBS，过免疫亲和柱，再加10mlPBS洗，流速2-3秒一滴，最后吸干。
    之后加1ml甲醇浸1min，收集在刻度试管内，再加1ml甲醇洗，吸干，氮吹，甲醇定容至2ml。

    现在回收率很不稳定不知道什么原因，免疫亲和柱个别流速会越来越慢，方法里没有提到过滤，是不是影响到了柱子结合抗体的能力。
    求大侠回复指导。我们用的是romer的免疫亲和柱
  • 分
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    +关注 私聊

  • hujiangtao

    第1楼2013/08/05

    应助达人

    过柱子时一定要控制好流速，这个实验免疫亲和柱质量好坏直接决定了回收率的稳定

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    +关注 私聊

  • zgylucky

    第2楼2013/08/30

    romer的免疫亲和柱在使用前要在室温下放置1.5-2小时，上样液中乙腈比例最好不要超过5%。

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