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水解蛋白类物质的检测

童话仙子

2014/05/16

乳制品检测

原理
用硝酸汞沉淀除去乳酪蛋白，但水解蛋白不会被除去，与饱和苦味酸产生沉淀反应。
试剂配制
除蛋白试剂：硝酸汞14g，加入100mL蒸馏水，加浓硝酸约2.5mL，加热助溶，待试剂全部溶解后加蒸馏水至500mL。溶液出现混浊等污染现象停止使用。
饱和苦味酸溶液：称取2 克固体苦味酸于烧杯中，用冷却的蒸馏水定容至100mL,后将定容好的溶液倒入烧杯中煮沸（沸腾即可），然后将液体冷却，待结晶析出后将上清液倒入试剂瓶中。
样品处理
奶粉样品的处理：
(1)将样品旋转振荡，使之充分混合；
(2)准确称取6g 样品，加入50ml 中性温水（60℃左右），充分溶解样品。原料奶样品：将样品充分混合即可。
操作方法
取5mL 待检处理过的样品，放入干净干燥的平皿或其他容器内，加除蛋白试剂5mL 混合均匀，边加边摇动，不可产生大体积蓄状物，将摇匀的液体用快速定量滤纸过滤于试管中，收集滤液约3mL左右。然后沿试管壁慢慢加入饱和苦味酸溶液约0.5mL（每加0.5mL约需要30-40秒），切勿使滤液与苦味酸混合(加入的苦味酸溶液层不超出总液体体积的1/3)。
结果判断
方法判定一（沉淀圈判定）：加入苦味酸后，在10 秒内逆光或在黑色背景下）上下左右移动不同方位观察产生沉淀圈情况，无沉淀圈判定为阴性，有明显沉淀圈判定为阳性。按产生沉淀圈情况进行“阴性、阳性”判定：

分
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