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水解蛋白类物质的检测
童话仙子
2014/05/16
私聊
乳制品检测
原理
用硝酸汞沉淀除去乳酪蛋白,但水解蛋白不会被除去,与饱和苦味酸产生沉淀反应。
试剂配制
除蛋白试剂:硝酸汞14g,加入100mL蒸馏水,加浓硝酸约2.5mL,加热助溶,待试剂全部溶解后加蒸馏水至500mL。溶液出现混浊等污染现象停止使用。
饱和苦味酸溶液:称取2 克固体苦味酸于烧杯中,用冷却的蒸馏水定容至100mL,后将定容好的溶液倒入烧杯中煮沸(沸腾即可),然后将液体冷却,待结晶析出后将上清液倒入试剂瓶中。
样品处理
奶粉样品的处理:
(1)将样品旋转振荡,使之充分混合;
(2)准确称取6g 样品,加入50ml 中性温水(60℃左右),充分溶解样品。 原料奶样品:将样品充分混合即可。
操作方法
取5mL 待检处理过的样品,放入干净干燥的平皿或其他容器内,加除蛋白试剂5mL 混合均匀,边加边摇动,不可产生大体积蓄状物,将摇匀的液体用快速定量滤纸过滤于试管中,收集滤液约3mL左右。 然后沿试管壁慢慢加入饱和苦味酸溶液约0.5mL(每加0.5mL约需要30-40秒),切勿使滤液与苦味酸混合(加入的苦味酸溶液层不超出总液体体积的1/3)。
结果判断
方法判定一(沉淀圈判定):加入苦味酸后,在10 秒内逆光或在黑色背景下)上下左右移动不同方位观察产生沉淀圈情况,无沉淀圈判定为阴性,有明显沉淀圈判定为阳性。 按产生沉淀圈情况进行“阴性、阳性”判定:
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童话仙子
第1楼
2014/05/16
阳性实验是用蛋白胨做吗
0
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