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关于液相流动相梯度

  • 梦想起航
    2014/11/03
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:10积分状态:已解决
  • 各位前辈,请教个梯度的问题。

    流动相B甲醇;A 10mmol/L的磷酸二氢甲缓冲液(用磷酸调至2)

    设置梯度:0:A 80% ;B 20%

    3:A 80% ;B 20%

    8:A 20% ;B 80%

    10:A 20% ;B 80%

    10.1:A 80% ;B 20%

    12:A 80% ;B 20%

    就是这么个梯度,我的疑问是:缓冲盐遇到大浓度的有机相不会在色谱柱中析出吗,这个梯度没问题吗(来源于某一检测方法);水相带缓冲盐的与有机相混合的梯度应该怎样设置,有哪些注意事项呢?

    谢谢各位大神了!

夏天的雪 2014/11/03

缓冲盐的析出需要一个过程,并不是与有机相混合就会立即析出,楼主担心有析出可以预先配制相应浓度的混合液,检查看是否会析出;使用缓冲盐需要注意,用完后及时用水和低浓度的有机相冲洗色谱柱和仪器,否则时间长了会在一些管路接头或泵的位置发现白色物质;楼主用的流动相调的pH比较低,使用时需要检查色谱柱的耐受范围,以及配置流动相时不要配错,防止损坏色谱柱

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  • 夏天的雪

    第1楼2014/11/03

    应助达人

    缓冲盐的析出需要一个过程,并不是与有机相混合就会立即析出,楼主担心有析出可以预先配制相应浓度的混合液,检查看是否会析出;使用缓冲盐需要注意,用完后及时用水和低浓度的有机相冲洗色谱柱和仪器,否则时间长了会在一些管路接头或泵的位置发现白色物质;楼主用的流动相调的pH比较低,使用时需要检查色谱柱的耐受范围,以及配置流动相时不要配错,防止损坏色谱柱

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  • 浪淘沙隐

    第2楼2014/11/03

    80%乙腈20%的10mM磷酸盐我们经常用,没什么事。
    使用80%乙腈20%的10mM磷酸盐预混可能会析出,但是高压下析出可能减小。
    我倒是感觉梯度变化太快了。

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  • 梦想起航

    第3楼2014/11/03

    好的,谢谢!

    您指哪一部分变化快啊,欢迎指出,这方法也在摸

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  • 夏天的雪

    第4楼2014/11/03

    应助达人

    需要结合色谱图调节流动相

    梦想起航(v2858693) 发表:好的,谢谢!

    您指哪一部分变化快啊,欢迎指出,这方法也在摸

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  • 夏天的雪

    第5楼2014/11/03

    应助达人

    倒数第二步变化的有点快

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  • dywzqbx

    第6楼2014/11/13

    应助达人

    这个程序10min 应该就完了,后面2min是平衡色谱柱。之前这样做,应该没什么问题吧

    夏天的雪(bingwang228) 发表:倒数第二步变化的有点快

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  • 夏天的雪

    第7楼2014/11/13

    应助达人

    3-8min基线有没有漂,如果不飘不影响检测应该没有什么问题。

    dywzqbx(dywzqbx) 发表:这个程序10min 应该就完了,后面2min是平衡色谱柱。之前这样做,应该没什么问题吧

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  • 有水有渝

    第8楼2014/12/17

    应助达人

    取8mLA与2mLB手动混合摇匀,在一起看看有没有析出,正常情况下应该不会析出结晶。

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  • linda427524

    第9楼2014/12/24

    我做过15%的0.01mol/l磷酸盐pH7.0-85%乙腈,没有问题 一般不会析出的盐浓度不高

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