液相保留时间

应助达人

同分异构体性质往往差异很大，对于结构相近性质相似的同分异构体，根据分析物的性质通过选择适宜的色谱柱，以及流动相的种类，配比设置，流速的调整可能会有比较好的分离效果，不过，随着时间的延长，后出的峰展宽现象不可避免，给正确的积分也会造成误差。

应助达人

楼主最好给出分析物的结构以及所选的检测条件，以便于妥当地讨论分析被测组分的分离条件，更好地解决存在的问题。

有条件还是试试别的柱子。

应助达人

能不能完全分离，看两者的差异性有多大，通过调节流动相看两者的分离趋势有多大，如果分离趋势很小，就比较难分了。保留时间太晚会导致峰的展宽太大，检出限变化，甚至可能会出现未检出的

应助达人

为什么会走梯度？
如果是成分很多的话，时间长一点也是可以理解的

应助达人

为了分的更好，或者是节约检测时间吧

要优化一个分析方法，需要分析这个化合物的性质，如果这个化合物是碱性化合物，那么提高流动相的pH值，可能会增加分离度；如果这个化合物是酸性化合物，那么降低流动相的pH值，有可能会增加分离度。当然，有时候pH改变的不多，可能分离度变化不明显，，这时候可以再将pH改变多一点，比如开始试过了pH7，不行，接着试试pH5，还不行就试pH3、pH2，找出趋势，就能帮助判断了。

同分异构体，分离不好，但是出现分开的趋势，除了优化梯度条件以外，还可以考虑提高塔板数。
1.加长色谱柱。原来150mm就用250mm或者串联试试。或者用小颗粒的柱填料。
2.试试不同的填料性质，比如C30或者PAH什么的。

调节梯度试试，如果分离度变化不大的话，更换色谱柱试试。如果分离度可以，峰型不佳的话，可以加点峰型调节剂试试。或者可以考虑衍生化之后再进行分离。