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校准曲线(一):过原点还是不过原点

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    2015/11/08
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 开始之前,先了解一下定量的方式有哪些:
    1定量的方式
    校准曲线的目的是为了准确的计算样品的含量,那么常用的定量方式有两种:外标法和内标法。
    外标法比较简单,就是通过样品的面积和标样的面积相比较从而计算出样品的含量
    而内标法是通过向标样中加入固定浓度的内标,计算内标和标样的比值从而计算出样品的含量,这两种方式的选择会在后面几期中写到。
    2单点线性和两点线性
    校准曲线的选择有很多,经常用到的是线性方程(Linear),如方程1:

    y是峰面积,x是浓度,m是斜率,b是截距
    如果过原点,就可以表示为方程2:

    方程2经常用于单点线性,如果样品的浓度比较稳定,都是集中在某个浓度点附近,那么就可以选择一个浓度与样品浓度接近的标样,用单点线性定量。譬如医药产品某种物质含量的测定,这种物质的含量要求都是一致的,那么就可以用单点线性
    方程2同样也可以用于两点线性,如果样品浓度范围比较窄,变化范围不超过一个数量级,那么就可以选择两点线性。
    3多点线性
    多点线性针对样品的溶度范围比较宽,Table 1的例子是一个多点线性,线性从1ng/ml到1000ng/ml,共10点

    如果选择线性过原点,线性的方程是y=0.9975x,如果选择线性不过原点,线性的方程是y=0.9963x+0.8101
    同时也给出了这两种方程下每个浓度点的偏差
    4过原点还是不过原点
    是否选择过原点就是选择要不要让截距b等于0,如果截距b接近原点,那么就可以选择过原点,这个接近程度该如何计算呢 ?
    以table1为例,计算了截距b的标准偏差SD是0.5244,如tale2所示:

    其中1.4134是针对曲线的标准偏差
    那么如果截距b小于截距的标准偏差,那么就可以过原点,否则是不能原点


    如table 1的例子,截距 b是0.8101,截距的标准偏差是0.5244,0.8101大于0.5244,是不能过原点,要选择方程y=0.9963x+0.8101
    如果强制过原点,选择方程y=0.9975x,就会发现每个浓度点的偏差增大,尤其是低的浓度点,已经达到了45%的偏差。
    所以线性要不要过原点,取决于截距接近原点的程度,如果截距小于一倍的截距标准偏差,就可以过原点 ,不然就不能过原点。如果强制过原点,就会造成浓度点偏差增大。
    1定量的方式
    校准曲线的目的是为了准确的计算样品的含量,那么常用的定量方式有两种:外标法和内标法。
    外标法比较简单,就是通过样品的面积和标样的面积相比较从而计算出样品的含量
    而内标法是通过向标样中加入固定浓度的内标,计算内标和标样的比值从而计算出样品的含量,这两种方式的选择会在后面几期中写到。
    2单点线性和两点线性
    校准曲线的选择有很多,经常用到的是线性方程(Linear),如方程1:

    y是峰面积,x是浓度,m是斜率,b是截距
    如果过原点,就可以表示为方程2:

    方程2经常用于单点线性,如果样品的浓度比较稳定,都是集中在某个浓度点附近,那么就可以选择一个浓度与样品浓度接近的标样,用单点线性定量。譬如医药产品某种物质含量的测定,这种物质的含量要求都是一致的,那么就可以用单点线性
    方程2同样也可以用于两点线性,如果样品浓度范围比较窄,变化范围不超过一个数量级,那么就可以选择两点线性。

    3多点线性
    多点线性针对样品的溶度范围比较宽,Table 1的例子是一个多点线性,线性从1ng/ml到1000ng/ml,共10点

    如果选择线性过原点,线性的方程是y=0.9975x,如果选择线性不过原点,线性的方程是y=0.9963x+0.8101
    同时也给出了这两种方程下每个浓度点的偏差
    4过原点还是不过原点
    是否选择过原点就是选择要不要让截距b等于0,如果截距b接近原点,那么就可以选择过原点,这个接近程度该如何计算呢 ?
    以table1为例,计算了截距b的标准偏差SD是0.5244,如tale2所示:

    其中1.4134是针对曲线的标准偏差
    那么如果截距b小于截距的标准偏差,那么就可以过原点,否则是不能原点


    如table 1的例子,截距 b是0.8101,截距的标准偏差是0.5244,0.8101大于0.5244,是不能过原点,要选择方程y=0.9963x+0.8101
    如果强制过原点,选择方程y=0.9975x,就会发现每个浓度点的偏差增大,尤其是低的浓度点,已经达到了45%的偏差。
    所以线性要不要过原点,取决于截距接近原点的程度,如果截距小于一倍的截距标准偏差,就可以过原点 ,不然就不能过原点。如果强制过原点,就会造成浓度点偏差增大。
    [div]导语


    在实际测试中,会遇到很多关于校准曲线的问题:是外标法还是内标法?是单点线性还是多点线性?要不要过原点呢?线性的最低浓度应该是多少?诸如此类的问题,那么今天讨论一下:线性是否要过原点

  • 该帖子已被版主-20071940xu加2积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖
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  • ie4680180

    第1楼2015/11/09

    应助达人

    不错的帖子,可惜看不到图片。呵呵

1
    +关注 私聊
  • WUYUWUQIU

    第2楼2015/11/09

    应助达人

    图片看不到

0
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  • 微信Lab_Map

    第3楼2015/11/11

    微信上转来的,不好意思

    ie4680180(ie4680180) 发表:不错的帖子,可惜看不到图片。呵呵

0
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  • 微信Lab_Map

    第4楼2015/11/11

    微信上转来的

    WUYUWUQIU(wulin321) 发表:图片看不到

0
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  • 20071940xu

    第5楼2015/11/12

    可以在电脑上修改下

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