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液相梯度出峰，等度不出峰的问题

bbbff

2015/12/30

液相色谱（LC）

我最近在做一个多肽(体系中只有一个物质)的液相谱图，反相C18的柱子，流动相是乙睛B水A,千分之一的三伏乙酸。用梯度洗脱0-25min ,24%-49%，在19分钟能够出峰，但是之后用70%的乙睛等度洗脱，无法出峰。请问问这是为什么呢？实验重复做了几遍，确认仪器设备没有问题，就是梯度能出等度不能出，就想问问能不能知道为什么？

分
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老多_小多

第1楼2015/12/31

那个峰不一定就是多肽的峰

0

hujiangtao

第2楼2015/12/31

应助达人

这个峰怎么和气相的峰类似？一般液相出不来这么尖锐的

0

夏天的雪

第3楼2015/12/31

应助达人

有可能是梯度转换时产生的峰，并不一定是待测物质的峰

0

lsyecspc

第4楼2015/12/31

应助达人

梯度PH会发生变化，看看您做的多肽在不同PH下有什么变化。

0

bbbff

第5楼2016/01/01

忘记说明了。这个是该多肽的质谱图，液相图是普通的图，没有上
hujiangtao(hujiangtao)发表:这个峰怎么和气相的峰类似？一般液相出不来这么尖锐的

0

bbbff

第6楼2016/01/01

学习了，谢谢
lsyecspc(liushuyong)发表:梯度PH会发生变化，看看您做的多肽在不同PH下有什么变化。

0

bbbff

第7楼2016/01/01

学习了，我再试试看，谢谢
夏天的雪(bingwang228)发表:有可能是梯度转换时产生的峰，并不一定是待测物质的峰

0

seannoy

第8楼2016/01/04

可能和背景吸收等有关我们这边做多肽也有梯度出峰等度不出峰的现象

0

52nimo

第9楼2016/01/12

你用70%的乙睛等梯度时，有加离子对试剂三氟乙酸吗？
这个很重要，你描述里没提

0

支点

第10楼2016/01/15

应助达人

24%-49%的梯度，为什么直接就是70%的等度,低一些的等度试过么

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