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新人请教关于气相色谱的一些疑问,大神求赐教

气相色谱(GC)

  • 小弟初学气相色谱,由于课题组没有人做过,新摸索,所以好多问题不懂。我是要做一个培养实验,往固氮蓝藻培养瓶中打入乙炔气体,乙炔和固氮酶反应生成乙烯,测定生成的乙烯的量就能知道我要测定的藻的固氮速率,进而可以推算出研究海域的一个总固氮量。这个过程中要用到气相色谱测乙烯,现在关于气相色谱的一些疑问请大神赐教,万分感谢!
    1.关于色谱图出峰的问题。我打算订购安捷伦氧化铝的毛细管柱子,安捷伦工程师给我发了几篇参考文献,里面有几张烯烃类物质的出峰图。我想请问一下,我用参考文献中的柱子,并且设置的条件大致一样,是不是乙烯的出峰时间和给定图中的基本相似?
    2.关于气相色谱一些参数。文献中部分参数给的不全,主要是缺少几个压力。分别是进样口压力和色谱柱压力,文献中给的进样口温度是175℃,色谱柱的流速为4ml/min。请问这两个压力应该设置多少?或者说这两个压力的范围大致是多少?
    3.关于顶空参数设置的问题。我们借用的仪器是用顶空进样器,但是文章中没有关于顶空参数的设置。包括加热箱,定量环,传输线,GC循环时间,平衡时间,压力平衡时间和进样时间这些参数。请问一下这部分参数设置的大致范围是多少?这部分参数和上面的气相色谱参数设置有关联吗?
    4.关于标准气体的疑问。我购买了乙烯的标准气体(99.9%),我现在想用标准气体跑一下大体的出峰时间让我心里有一个底。请问下,用标准气体跑出峰时间有什么注意事项或者经验之谈,让我少走弯路?比如说这个标准气体要稀释多少倍之后测效果好?
    暂时先这么多疑问,跪求大神帮我解答!附上安捷伦给我的两篇文献,谢谢
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  • MMYG

    第1楼2016/07/08

    应助达人

    等待验证再看文献。有没有标准方法??

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  • 安平

    第2楼2016/07/08

    应助达人

    1 体系有水吧?最好不用氧化铝

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  • 木木溪

    第3楼2016/07/08

    对,培养试验是有水的。培养结束之后要把产生的气体用气密针吸取一部分出来,然后进样测。我们之前看了一篇文献中用的是5A分子筛的柱子,摸了半年没弄出来。然后打电话去咨询,说是分子筛柱子不适合测乙烯。推荐使用氧化铝的柱子,这个柱子适合测C1-C6轻烯烃测量。

    安平(byron1111) 发表:1 体系有水吧?最好不用氧化铝

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  • 木木溪

    第4楼2016/07/08

    老师您好。实验有方法,但是实验中测气相色谱是没有很详细说明的,包括条件什么的都不是很清楚,所以咱们也只能自己摸索。

    MMYG(jl070869) 发表:等待验证再看文献。有没有标准方法??

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  • 安平

    第5楼2016/07/08

    应助达人

    1 最好不用氧化铝,可以用GDX或者PLOT Q。
    分子筛不可以用的。

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  • 木木溪

    第6楼2016/07/08

    谢谢您的提醒,我还没买呢,再和工程师商量商量。麻烦的是我没做过气相色谱,条件不会设置,怕做不出来,柱子也白买了!

    安平(byron1111) 发表:1 最好不用氧化铝,可以用GDX或者PLOT Q。
    分子筛不可以用的。

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  • 安平

    第7楼2016/07/08

    应助达人

    2 第二个问题,要看实际的色谱柱而定。

    色谱柱内径越大,适合的流速就越大。

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  • 安平

    第8楼2016/07/08

    应助达人

    3 第3个问题。

    顶空温度应该不会太高,可以在40度左右实验,传输线温度、阀温度要比样品顶空温度高20度左右。

    顶空程序时间要根据GC分析的情况来修订。
    4 第四个问题,不要使用这种基本是纯物质的标气,最好预先大体知道待测组分的浓度,然后配置浓度接近的标准气体。
    两篇文献对于楼主的分析,参考意义不太大。

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  • 木木溪

    第9楼2016/07/09

    谢谢老师的解答,关于第四个问题,目前我还没开展实验,所以不太确定我所做的能产生多少乙烯,但浓度应该不会太大。我参考一篇文献中的大致浓度范围,设计了一个浓度梯度,请老师帮我看下可不可行?
    大致步骤:取6个600ml盐水瓶,往盐水瓶中加入100ml饱和食盐水,盖上密封瓶塞。用气密针分别抽0.5μL,1μL,2μL,4μL,8μL,10μL的乙烯标准气体(99.9%),打入盐水瓶。配置好的乙烯的梯度浓度分别为0.999μmol/mol,1.998μmol/mol,3.996μmol/mol,7.992μmol/mol,15.984μmol/mol,19.98μmol/mol。然后在用气密针抽100μL的混合气体打入顶空瓶中,在用气相色谱测量。

    安平(byron1111) 发表: 3 第3个问题。

    顶空温度应该不会太高,可以在40度左右实验,传输线温度、阀温度要比样品顶空温度高20度左右。

    顶空程序时间要根据GC分析的情况来修订。
    4 第四个问题,不要使用这种基本是纯物质的标气,最好预先大体知道待测组分的浓度,然后配置浓度接近的标准气体。
    两篇文献对于楼主的分析,参考意义不太大。

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  • 安平

    第10楼2016/07/09

    应助达人

    理论上可以,但准确度精密度可能不会太好

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