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标准曲线溶液的配制

液相色谱(LC)

  • 关于标准曲线溶液的配制,现在大概有两种方法:
    1.用高浓度的标准品逐级稀释。
    2.取不同体积的高浓度标准品,分别定容。
    两种方法哪个好?理由?
    另外,在做相关检测的标准曲线时,一般会选择5个不同浓度的标准品,如何选取这5个浓度才最理想?
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  • 夏天的雪

    第1楼2016/10/24

    应助达人

    一般是配制高浓度的储备液然后逐级稀释,因为低浓度的标准溶液称样量少,不好操作。样品的浓度一定要在测定的标准曲线范围内,最好处于中间位置

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  • p3134650

    第2楼2016/10/24

    应助达人

    那用高浓度的液体标准品,取不同体积分别定容,这种方法的劣势在哪?
    如果用单点定量的话,这个点的浓度应该怎么选取呢?
    举例:苯甲酸和山梨酸,一个是0.1,一个是0.5,如果一定要用单点定量,怎么选取这个浓度点最好呢?

    夏天的雪(bingwang228) 发表:一般是配制高浓度的储备液然后逐级稀释,因为低浓度的标准溶液称样量少,不好操作。样品的浓度一定要在测定的标准曲线范围内,最好处于中间位置

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  • 有水有渝

    第3楼2016/10/24

    应助达人

    我怎么感觉这两种方法本质上是一个方法,从高浓度一步到低浓度的叫方法2,从高浓度到中间浓度再到低浓度的叫逐级稀释吗?
    一般相邻两个级别之间的浓度差0.5-1倍。

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  • 夏天的雪

    第4楼2016/10/25

    应助达人

    吸取体积稀释,楼主的方法应该是差不多的,主要考虑标准品的量够不够。我理解楼主的意思可能是指,一个吸取相同体积的标准品定容到不同体积的容量瓶,另一个方法是吸取不同体积的标准品定容到相同体积的容量瓶,不知道理解的对不对
    如果单点,最好是配制0.1和0.5,直接对比比较就行了,超过了就是不合格,小于就是合格,在边缘值就要考虑不确定度

    p3134650(p3134650) 发表: 那用高浓度的液体标准品,取不同体积分别定容,这种方法的劣势在哪?
    如果用单点定量的话,这个点的浓度应该怎么选取呢?
    举例:苯甲酸和山梨酸,一个是0.1,一个是0.5,如果一定要用单点定量,怎么选取这个浓度点最好呢?

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  • 支点

    第5楼2016/10/25

    应助达人

    理解一下,一个是高浓A配B,用B配C。二是高浓度A,分别配B,C。我是喜欢用第二种方法。没想那么多理由,也可能是逐级会造成误差的累加吧。
    陪多级标一般用1X,2X,4X,8X,16X,然后注意限量点在曲线线性范围内。

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  • p3134650

    第6楼2016/10/25

    应助达人

    是我表达的不太清楚。
    举例:第一种,1000浓度稀释到100,然后用100浓度再稀释到10,最后用10浓度稀释到1.
    第二种,1000浓度的,去不同的体积,分别定容,得到100和10的浓度。

    夏天的雪(bingwang228) 发表: 吸取体积稀释,楼主的方法应该是差不多的,主要考虑标准品的量够不够。我理解楼主的意思可能是指,一个吸取相同体积的标准品定容到不同体积的容量瓶,另一个方法是吸取不同体积的标准品定容到相同体积的容量瓶,不知道理解的对不对
    如果单点,最好是配制0.1和0.5,直接对比比较就行了,超过了就是不合格,小于就是合格,在边缘值就要考虑不确定度

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  • p3134650

    第7楼2016/10/25

    应助达人

    我理解的逐级稀释就是这样的,不知道对不对

    有水有渝(xky0230699) 发表:我怎么感觉这两种方法本质上是一个方法,从高浓度一步到低浓度的叫方法2,从高浓度到中间浓度再到低浓度的叫逐级稀释吗?
    一般相邻两个级别之间的浓度差0.5-1倍。

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  • p3134650

    第8楼2016/10/25

    应助达人

    感谢回复!我个人也倾向于第二种,但是有的时候,从储备液的浓度直接稀释到一个很小的浓度,是用移液枪还是小量程的移液管好呢?

    支点(zhx_fs_ln) 发表:理解一下,一个是高浓A配B,用B配C。二是高浓度A,分别配B,C。我是喜欢用第二种方法。没想那么多理由,也可能是逐级会造成误差的累加吧。
    陪多级标一般用1X,2X,4X,8X,16X,然后注意限量点在曲线线性范围内。

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  • 有水有渝

    第9楼2016/10/25

    应助达人

    这个要看移液管与容量瓶的配置,组合出最小误差。比如1000到100,可以是1到10mL,也可以5到50mL,后者的误差肯定比前者小,1000到10那只能1到100mL,如果是我,会根据所要的浓度范围来选择稀释方法,如果是10-100范围,就1,2,3,```10到100,如果是1-10范围的,以10到100为中间液,再1,2,3,```10到100。只在一个原则,误差最小。

    p3134650(p3134650) 发表: 是我表达的不太清楚。
    举例:第一种,1000浓度稀释到100,然后用100浓度再稀释到10,最后用10浓度稀释到1.
    第二种,1000浓度的,去不同的体积,分别定容,得到100和10的浓度。

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  • p3134650

    第10楼2016/10/25

    应助达人

    明白了,谢谢。

    有水有渝(xky0230699) 发表: 这个要看移液管与容量瓶的配置,组合出最小误差。比如1000到100,可以是1到10mL,也可以5到50mL,后者的误差肯定比前者小,1000到10那只能1到100mL,如果是我,会根据所要的浓度范围来选择稀释方法,如果是10-100范围,就1,2,3,```10到100,如果是1-10范围的,以10到100为中间液,再1,2,3,```10到100。只在一个原则,误差最小。

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