液相验证，液相验证

应助达人

液相有检定规程，可以按照检定规程做简单的验证，通常装机验证就做个线性和重复性

好的，我在找找资料。谢谢啦

0.1 输液系统：
0.1.1 梯度误差GC不超过?3%
0.1.2 泵流量设定值误差 Ss＜?2%
0.1.3 流量稳定性误差 SR＜?2%
0.2 紫外检测器性能
0.2.1 基线噪声不超过5?10-4AU，基线漂移不超过5?10-3AU
0.2.2 定量测量重复性误差（6次进样）RSD≤1.5%
0.2.3 最小检测浓度不超过1?10-7g/ml萘/甲醇溶液
0.2.4 可调波长紫外可见光检测器波长示值不超过?2nm(HP1100高效液相色谱仪可由仪器自身完成)
1 校正条件
1.1 环境温度10-30℃，相对湿度低于65%
1.2 校正设备
1.2.1 秒表 分度值小于0.1 s
1.2.2 分析天平 最大称量200g,最小分度值0.1mg
1.2.3 容量瓶
1.2.4 微量注射器
1.3 标准物质和试剂
1.3.1 HPLC用甲醇、纯水，分析纯的丙酮
1.3.2 1?10-4g/ml，1?10-7g/ml的萘甲醇溶液
1.3.3 紫外波长标准溶液
2 校正方法
2.1 梯度误差GC的校正
2.1.1 进行梯度洗脱程序，A溶剂为水，B溶剂为0.1%丙酮的水溶液，B经5个阶段从0变到100%，20%—40%—60%—80%—100%，重复测量两次，取平均值，求各段梯度误差Gci，取最大作为仪器梯度误差，公式：Gci=（Li—Lm）/Lm?100%
Li：第i段信号值的平均值； Lm­ ：各段输出信号平均值的平均值
可接受标准： -3%≤Gci≤3%
2.2 泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的校正
2.2.1 将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器联接好，以甲醇为流动相，按表一设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确的收集10-25分钟，称重，按下式计算流动相流量设定值误差Ss和流动相流量稳定性误差SR。公式：Ss=（Fm-FS）/Fs 100%
可接受标准：-2%≤Ss≤2%
SR=（Fmax-Fmin）/F?100%
可接受标准：-2%≤SR≤2%
Ss：流量设定值误差（%）； Fm=（W2- W1）/ρt.t：流量实测值（ml/min）
W2 ：容量瓶 流动相的重量（g）； W1：容量瓶的重量（g）； Fs：流量设定值（ml/min）；
ρt：实验室温度下流动相的密度（g/cm3）； t：收集流动相的时间（min）；
SR ：流量稳定性误差（%）； Fmax 为同一组测量中流量最大值（ml/min）；
Fmin：同一组测量中流量最小值（ml/min）； F 为同一组测量值的算术平均值（ml/min）
表一：Ss和SR的校正

流量设定值（ml/min）   
1.0   
1.5

测量次数   
3   
3

收集流动相时间（min）   
15   
10

允许误差   
Ss   
2％   
2％
   
SR   
2％   
2％

2.3 基线噪声和漂移
2.3.1 选用C18的色谱柱，以波长254nm,流动相为100%甲醇，流速1.0ml/min，仪器稳定后记录基线30min，求基线噪声Nd。可接受标准：Nd≤5?10-4AU
2.3.2 基线漂移用1h内基线偏离原点的值（AU/h）表示。可接受标准：D≤5?10-3AU/h
2.4 最小检测浓度
2.4.1 以上述色谱条件下，进样20ul的1?10-7g/ml的萘甲醇溶液，计算最小检测浓度CL。公式：

CL=
2 Nd C?20
HV
Nd：基线噪声，mm； C：标准溶液浓度，g/ml；
H：标准溶液色谱峰的峰高，mm； V——进样体积，ul。
2.4.2 可接受标准：CL≤1?10-7g/ml
2.5 定量测定重复性的校正
将仪器联接好，使之处于正常工作状态，波长254nm,流动相为100%甲醇，流速1.0ml/min,用萘的甲醇溶液连续进样6次记录下峰面积，按下式计算相对标准偏差：
n
RSD = [∑（Xi- X ）2]/（n-1）?(1/ X )?100%
I=1
RSD：相对标准偏差（%）； n：测量次数； Xi：第I次测量的峰面积
X – n次进样的峰面积算术平均值
可接受标准：RSD≤1.5%
2.6 波长示值误差
2.6.1 用注射器将紫外波长标准溶液（标准波长为235nm，257nm，313nm和350nm）从检测器入口注入样品池冲洗，并将池充满，将波长调到低于标准波长5nm处，到标准波长 4nm处，测得的最大吸收值处对应的波长与标准波长之差为波长示值误差；目前仪器可以在1ml/min的流量下，直接用空管连接检测器，每隔2min改变1nm，连续进标准样10ul，同样可得波长示值误差。
2.6.2 可调波长紫外可见光检测器波长示值误差 (此项只适用于HP1100高效液相色谱仪且带有HP工作站)。
2.6.3 打开HP1100液相色谱仪和HP工作站，打开输液泵和检测器，用纯水冲洗系统直至稳定，进入 Diagnosis窗口，点击氘灯图标，进入 show module tests状态，点击VWD VL calibration test 点击start ，系统自动进入校正状态，待校正完毕，将校正结果打印归档。
2.6.4 可接受标准：λ≤2nm
3 性能确认
3.1 使用标准品或供试品，确认仪器性能符合使用要求；
3.2 先进行色谱柱的性能确认，内容包括：分离度，对称因子，理论塔板数和峰面积标准偏差。
3.3 液相色谱柱的确认
3.3.1 测试标准样配制：称量1000mg苯酚，100mg联苯加入到100ml容量瓶中，移入邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯各1ml，然后用甲醇定容到100ml，混匀，从中移取1ml该溶液，用乙腈：水=70：30定容至100ml。
3.3.2 方法：流动相为乙腈：水=70：30，流速为1.0ml/min,波长为254nm,温度为30℃，进样量为：10ul,运行10min。
3.3.3 色谱柱：Extend-C18 Analytical, 5um,4.6*250mm。
3.3.4 连续进行5次分析，分离度均R＞1.5；邻苯二甲酸二乙酯对称因子S在0.80～1.50范围内；邻苯二甲酸二乙酯柱效＞3000m-1；邻苯二甲酸二乙酯峰面积的标准偏差应≤1.5%。