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做含量结果出来发现比厂家的少了5个点,大家帮我分析分析是什么原因

液相色谱(LC)

  • 如题,做低聚果糖的含量。这批的低聚果糖厂家报告给的是95.7%,我刚做完检的才90.5%左右。然后我就拿上批的样品做了下,之前测的有95%,跟厂家的报告差不多,这次复测才91%。现在都蒙圈了,是机子问题?柱子问题?还是样品问题?
    (关于柱子:新柱是国产的氨基柱,柱子有点堵,压力现在11;旧柱是岛津柱氨基柱,很塞,所以拆塞板清洗。)
    条件:1.液相差不多3个月没用过,这次检测之前用甲醇冲了机子。
    2.柱子为氨基柱,这次检测的是用的旧柱子(岛津柱),之前塞的比较严重,这次用之前拆下筛板用水和5%稀硝酸超声清洗过(拆下塞板时发现还有保存溶剂的柱子填充颗粒上面有漂浮物,我当时认为是污染物,就用针头挑掉了),装上后发现压力从16mpa降为6.7mpa(这是清洗成功了吗?)。然后随便跑了下样和对照,发现峰面积变化不大,就决定用旧柱。(新柱也有点塞,压力都到11了。)
    3.上次用新柱做,后面有个峰很小,所以称样1.3g;这次旧柱称样1.0g(后面计算应该不会差很大吧)。这次在做完后也接上新柱(1.0g上次的样),测得也才91%(上次做1.3g样含量95.2%)。
    4.因为两次柱子不一样,所以流动相用的也不一样。上次:新柱,流动相 ——乙腈:水=73:27;这次:旧柱,流动相——乙腈:水=75:25。
    大概就这么多,大家帮我瞧瞧是什么问题。有什么不清楚的也可以问我,希望能早点解决。拜求各位大神指点!
  • 该帖子已被版主-夏天的雪加2积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖
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  • lijing320323

    第1楼2016/11/28

    机子,柱子,样品都有影响因素

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  • 有水有渝

    第2楼2016/11/28

    应助达人

    拆下塞板时发现还有保存溶剂的柱子填充颗粒上面有漂浮物,我当时认为是污染物,就用针头挑掉了
    这个没看明白,是把柱头填料挖了吗,如果挖了没有补回去这个柱也能用?

    流动相变化不大,基本可以认为没有问题,最大的可能仍是前处理,比如样品的溶解提取,如果有多个样品可以拿出来一起做,另外可以做一下加标回收率(可以试一下一半的样品量 一半的对照品量)。

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  • 黄仔

    第3楼2016/11/28

    兄台你这样让我很惆怅啊

    lijing320323(lijing320323) 发表:机子,柱子,样品都有影响因素

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  • 黄仔

    第4楼2016/11/28

    应该不是填料,拆开来柱子当时还有溶剂,是漂在上面的,而且颜色跟里面的填料不一样。,样品溶解没问题,很好溶解的糖,溶解完直接过滤的。现在我在换柱子做试试看,不行就按你的方法试试。

    有水有渝(xky0230699) 发表:拆下塞板时发现还有保存溶剂的柱子填充颗粒上面有漂浮物,我当时认为是污染物,就用针头挑掉了
    这个没看明白,是把柱头填料挖了吗,如果挖了没有补回去这个柱也能用?

    流动相变化不大,基本可以认为没有问题,最大的可能仍是前处理,比如样品的溶解提取,如果有多个样品可以拿出来一起做,另外可以做一下加标回收率(可以试一下一半的样品量 一半的对照品量)。

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  • 夏天的雪

    第5楼2016/11/28

    应助达人

    先检查两次标样的出峰面积是否一致,如果浓度一样,出峰面积差不多,可以排除标样和仪器的原因,否则就重新配制标样;样品提取是否有问题,是否提取完全,检查是否有未完全溶解的样品

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