色谱柱只能打一个样，第二个样就出问题了

换了好几个色谱柱都一样，我觉得就是流动相不合适，因为具体仪器条件没看到，如果是梯度或者在线混合的流动相，还可能是仪器问题

应助达人

换的色谱柱是新的色谱柱或者柱效好的色谱柱吗？红色的峰感觉柱效就很差了，可能还是色谱柱的原因。方法用了许多年，应该方法没有问题，检查流动相或者样品制备是否有变化。这两者都没有问题就考虑是否是仪器的问题，考虑后几步没有问题就第一针有问题，感觉仪器有问题的可能性也比较小，除非用的流路或者流动相不一致。所以还是先检查一下色谱柱或者流动相的配制

溶剂换了，你梯度改了么？

等度

是不是你样品还含有其他基质，进了色谱柱，所以要用甲醇冲洗出来，否则就影响了柱效

想过，但是还是先查自己

应助达人

你的流动相具体组成是什么？清洗后能恢复一下，一个是色谱柱崩塌了，一个是样品是不是复杂组分污染了色谱柱

要做好进样前后色谱柱与各流路的冲洗

目前的结论是用的乙腈有问题，