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TSK GEL G2000SWxl色谱柱柱效测定

上党之巅

2017/07/12

凝胶色谱（GPC）

TSK GEL G2000SWxl色谱柱柱效测定
实验目的：为保证新购买色谱柱的性能，符合标准使用要求。依据《色谱柱使用流程》对新购入的每根色谱柱都要进行性能测试，确认色谱柱的柱效符合使用要求。
TSK GEL G2000SWxl色谱柱是我单位测定某个成分的专用色谱柱，色谱柱详细信息如下：
TSK GEL G2000SWXL7.8mm×300mm，5μm Column No.06B00080C Part No.0008540
TSK GEL guardcolumn SWXL 6.0mm1.D.×4cm，7μm Column No.097B00127C Part No.0008543
色谱柱包装盒：

色谱柱及保护柱

实验依据：TSK GEL G2000SWxl色谱柱使用手册

一、实验仪器及试剂和样品
1、仪器：
高效液相色谱仪 Agilent1260 Agilent

电子天平（万分之一） TLE-204 梅特勒托利多
2、试剂
无水磷酸二氢钠 500g 分析纯 20160310 天津市光复精细化工研究所
十二水磷酸氢二钠 500g 分析纯 20140709 北京化工厂
无水硫酸钠 500g 分析纯 20160307 天津市福晨化学试剂厂
3、样品 SW样品 1mg 供应商提供
二、色谱条件

色谱柱TSK GEL G2000SWXL7.8mm×300mm，5μm）
流速1ml/min 柱温25℃
检测波长：280nm
流动相：0.1mol/LP.B+0.1mol/L NaSO4
进样体积20μl
三、实验过程
3.1、流动相的配制过程：
0.1mol/L NaSO4溶液配制：精密称取7.1037g至烧杯中，加水500ml溶解。
0.2mol/L NaH2PO4溶液配制：精密称取4.7989g至烧杯中，加水200ml溶解。

0.2mol/L Na2HPO4溶液配制：精密称取14.3195g至烧杯中，加水200ml溶解。
0.1mol/L P.B溶液配制：取0.2mol/L NaH2PO4溶液113ml，0.2mol/L Na2HPO4溶液87ml，水200ml至大烧杯中，摇匀即得。
流动相：0.1mol/LP.B+0.1mol/L NaSO4：取0.1mol/L P.B溶液400ml，0.1mol/L NaSO4溶液400ml至大烧杯中，摇匀即得滤过（津腾水系微孔滤膜0.2μm）
3.2：样品配制
将SW转移至100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，待测（浓度0.01mg/ml）
四、实验图谱和数据
连续进样3针图谱

五、实验结果
依据：TSK GEL G2000SWxl/BioAssist G2SWxl色谱柱使用手册标准要求：

理论塔板数≧20000，不对称因子0.7—1.6，因此该根色谱柱柱效测定符合规定，可以正常用于样品检验。

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小不董

第1楼2017/07/13

应助达人

只使用了一根柱子？光看柱效还不够，这柱子分离分子量范围为多少？
测定个高分子样品看看结果如何。

0

Flynnchen

第2楼2017/07/18

测分子量一般都是用2根或者3根色谱柱的吧！

0

上党之巅

第3楼2017/07/18

应助达人

我们不测分子量

0

lu_sunshine

第4楼2017/07/29

应助工程师

这个帖子中所说的类似于LC柱的测定

0

Flynnchen

第5楼2017/07/30

没时间搞了，

0

zyl3367898

第6楼2017/08/03

应助达人

对色谱柱进行柱效测定，一目了然。

0

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