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浅谈食品微生物检测注意事项

高秋荣

2017/08/15

食品毒素/微生物检测

浅谈食品微生物检测注意事项
西安国联质量检测技术股份有限公司
食品事业部：淮瑞娟

食品是人类的必需品，是人类赖以生存的源泉。食品卫生和人类的健康息息相关，随着人们的生活水平的提高，对食品质量的要求也越来越高，对食品安全也越来越重视，随着食品生产和消费的旺季来临，也是食品安全问题容易发生的敏感时期，故食品的微生物检验至关重要。
在微生物检测时我们按照我国卫生部颁布的《食品微生物学检验方法微生物学部分GB4789 －2010》进行检测，而在检测过程中我们该注意些什么？我认为应在以下几方面应注意。
1.样品检测前注意事项：
1.1人员：应当具有相应的微生物专业教育或者培训，应掌握生物安全操作及消毒知识，无菌概念，检测过程中保持个人卫生（不化浓妆，不留长指甲，不涂指甲，不带饰品）防止人为污染样品；
1.2样品：
1.2.1样品采集应遵循随机性，有代表性，样品应均匀化，采样过程一定要保证无菌，所用器皿全部进行灭菌处理；
1.2.2样品处理：接到样品后仔细核对信息，观察样品状态，处理样品严格按照无菌操作进行；
2.食品微生物检测无菌操作的注意事项
2.1环境与设施：无菌室的室内温度需保持在 20 ～ 24 ℃，湿度在 45% ～ 60% 。无菌间需定期打扫并消毒，保持无菌间的洁净度，且不得存放与实验无关的物品。每次使用前后都应关门紫外灭菌，时间不得少于 30min。在实验前及操作期间不得随意进出，尽量减少空气传递带来的污染，无菌室的洁净度需达到 10 000 级。超净台在每次操作前后也需要紫外灭菌至少 20 min，并打开吹风，保持超净台内洁净度达到 100 级。定期进行无菌室空间培养，要求＜3CFU/m³。对无菌室紫外灯进行定期监控，测试其辐照强度，必须＞70μW/cm²。人员进入无菌室必须经过洗手消毒，更换无菌服，灭菌好的帽子、手套、口罩，鞋子，进入无菌室将操作台面用75%酒精进行擦拭。无菌操作期间，不得说话交谈，以免口中细菌污染无菌环境。检测完毕，将无菌室用0.1%新洁尔灭擦拭，紫外照射1h。出无菌室后，在更衣间将检测后衣物更换，留在衣物盒，手套口罩帽子放入医疗垃圾桶。
2.2 器皿用具的洗涤和灭菌：新购的玻璃器皿需用 2% 的盐酸浸泡至少 3 h，冲净后再灭菌。用过的玻璃器皿和处理过的新玻璃器皿用报纸包好后置于 121 ℃ 下灭菌 30 min同时使用灭菌卡监控灭菌效果，并进行记录，80 ℃烘干后置于超净台里灭菌后使用。打开包装后未用的器皿均不能放置后再用，需再次灭菌。接种环和镊子等金属工具，需将镍铬丝环口等接触培养基的地方在火焰的氧化焰部位灼烧至红，然后将其余可能伸入试管或培养皿的部分均匀地通过火焰，冷却后进行接种。接种时，也需在酒精灯火焰周围进行，以保证无菌环境。
2.3培养基制备的基本原则和注意事项：
培养基是适合微生物生长繁殖的各种营养物质配制而成的营养基质。培养基必须是无菌，将新买的培养基按要求配置好经灭菌处理后，放入培养基培养，48小时后观察平板是否长菌，液体是否浑浊，如有菌或浑浊现象，证明该培养基非无菌。如图：
培养基储存应严格按照标识要求去保存和使用。注意培养基PH的测定和调整，使用1mol的氢氧化钠或盐酸调整，配制好的培养基要避免过度加热，将配制好的培养基分装到合适的容器中，容器体积应比培养基体积最少大20%，如图所示。

3.检测时注意事项：
3.1检测过程需无菌操作，按照要求进行检测，注意交叉污染；
3.2沙门氏菌检测注意事项：
3.2.1前增菌，应根据产品进行时间选择，一般预包装样品增菌18h,人为加工时间越短，增菌时间越短（为了避免其他菌干扰），SC配制时水浴煮沸10min，为无色透明液体，砖红色不可用；
3.2.2赖氨酸脱羧酶试验阳性反应不变色，培养基变黄为阴性，检测时应定要设空白对照，培养基要用石蜡封口，防止氧化，如图所示。

3.2.3观察血清凝集现象时，一定要进行对照试验，以防误判结果，现象如图示：

3.3金黄色葡萄球菌检测注意事项：
3.3.1涂布时应先将平板放在36℃培养箱过夜，使平板干燥，涂布时易于吸收；
3.3.2血浆凝固酶试验时必须设立对照试验，以便观察结果，结果如图所示：

3.4单核细胞增生李斯特氏菌检测注意事项：
溶血试验时，刺种时应尽量接近底部，但是不能穿透，其现象如图
刺穿后
4.医疗废弃物处理时注意事项：
检测完毕，所有污染物必须进行高压灭菌（121℃30min）处理，灭菌后物品使用黄色医疗垃圾袋装，放入专用的医疗垃圾桶，有专门机构进行处理。
食品微生物检测工作科学化、规范化要求越来越高，所以，从事微生物检测的工作人员必须具备严格的无菌观念，严谨的工作作风，遵守科学规范的操作规。

附件：

q浅谈微生物检测注意事项.docx

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zyl3367898

第1楼2017/09/03

应助达人

对注意事项进行了详细描述，有指导性。

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