【讨论】液相色谱测小分子量肽的柱子选择

用毛细管电泳做更好吧？

谢谢你的关注！
但是我的问题您还是没能让我满意，现在很多人用液相测，很实在的，因为存在要分离制备而不仅仅是分析。

具体是用凝胶柱还是用反相柱，要看你的目的是什么。
如果只是想把酶水解的产物有所分离，什么都可以。
如果想把每一个产物得到具体的分离（甚至鉴定序列，那要用反相）。
如果只是想看看酶水解的程度，可以用凝胶，这个相对简单，好分析。

洗脱液用什么，要看具体的蛋白/多肽，因为各种蛋白多肽的极性、溶解性不一样。
至于蒸馏水，一般不用，无论是凝胶柱，还是反相柱，都尽量避免用纯水来洗脱。

我准备用凝胶柱测水解物的分子量范围，然后根据不同的范围收集肽，然后再在以后的分析中用。那时候可能要分纯，测序等等。

半制备和制备的量一般没有明确的数，少量的制备一般就被称为半制备，如果制备的量比较大（具体有多大，可以是g级，也可以是mg级，甚至是Kg级才被成为制备，而非半制备），就称为制备。
有一个是肯定，无论是半制备液相，还是制备液相，其液相色谱分离后的产物是我们想要得到的产物。

如果想用酶水解蛋白，然后再用液相分离水解产物，最后用MS等手段解析水解产物，那这时的制备量可以到ng级就够用了，也就是酶水解蛋白时，蛋白的量有10到20微克就可以了。

您讲的比较详细，十分感谢，制备这方面稍懂了，

学习了,希望楼主做完了上传些总结性的东东,
支持中
盼望中

一般来说肽段用的是乙腈，水，磷酸或磷酸盐类的缓冲溶剂这些东西的混合体系。很多情况下PH值可能到2左右。所以柱子的选择还要考虑这些因素。我用C18柱做过，不过分子量只是一两千左右，没有到八九千。这个分子量范围反相柱不知道容不容易堵，柱压怎么样。你再看看文献。