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关于HPLC流动相pH的选择问题

  • 你一见我就笑2169
    2018/07/26
  • 私聊

液相色谱(LC)


  • 求助各位,有谁做过类似的分子?
    有问题想请教一下: 这两个分子的PKa值查不到。
    在选择HPLC条件时,选用了流动相A:0.1%磷酸的水溶液(PH约2.4),B:乙腈。 结果显示:样品保留极弱,主峰后面出现了一个很大的杂质峰,约7.0%,而核磁的结果中,未见明显杂质。考察过重复性和样品溶液稳定性,均良好。怀疑还是条件的问题。
    有尝试过A路更换为pH约7的缓冲液,结构显示:峰变形,严重展宽;
    也尝试过A路更换为pH约为9.4的缓冲液,结果显示:样品在该体系中不稳定,较多较大的杂质峰出现。
    两个分子都是同样的问题,核磁结果未见明显杂质,HPLC均有较大杂质出现。
    望各位经验丰富者,提一些宝贵建议,谢谢!这个杂质会不会是因为pH选择不恰当,而出现的主峰的另一种形态?

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  • dadgoh

    第1楼2018/07/26

    应助达人

    两个峰间距多大?

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  • 夏天的雪

    第2楼2018/07/27

    应助达人

    上个图看看,通过您的描述,可能酸性条件下更适合测定,小峰可能是杂质,也可能是物质在流动相条件反应的产物

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  • 有水有渝

    第3楼2018/07/27

    应助达人

    0.1%磷酸改为0.05%三氯乙酸试试,楼主液相配质谱吗,如果没有配质谱可以试试离子对色谱法

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  • 浪淘沙隐

    第4楼2018/07/28

    季胺盐碱性还是蛮强,使用三氟醋酸水溶液或高氯酸水溶液或许能改善峰形。
    至于“杂质峰”,我猜是溶剂效应导致,换一下溶剂试试。

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  • 你一见我就笑2169

    第5楼2018/07/30

    重新整理了详情,见附件,有劳了!

    dadgoh(dadgoh) 发表:两个峰间距多大?

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  • 你一见我就笑2169

    第6楼2018/07/30

    已经重新整理详情和图谱,见附件

    夏天的雪(bingwang228) 发表:上个图看看,通过您的描述,可能酸性条件下更适合测定,小峰可能是杂质,也可能是物质在流动相条件反应的产物

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  • 你一见我就笑2169

    第7楼2018/07/30

    已经上传了附件,整理了详情,麻烦了。
    再请教一下,没有连质谱,离子对试剂考虑什么试剂?一般多大浓度?

    有水有渝(xky0230699) 发表:0.1%磷酸改为0.05%三氯乙酸试试,楼主液相配质谱吗,如果没有配质谱可以试试离子对色谱法

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  • 你一见我就笑2169

    第8楼2018/07/30

    调节了pH到2.2,峰形明显改善了。
    “杂质峰”如何进一步确认?更换过溶解样品的溶剂,由原来的水:乙腈=1:1,更换为纯甲醇,主峰分叉,怀疑是溶剂与体系不一致导致。但后面的6%杂质也存在。

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:季胺盐碱性还是蛮强,使用三氟醋酸水溶液或高氯酸水溶液或许能改善峰形。
    至于“杂质峰”,我猜是溶剂效应导致,换一下溶剂试试。

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  • 有水有渝

    第9楼2018/07/31

    应助达人

    离子对用己或庚烷磺酸钠都可以的,浓度先试一下3mmol/L的,pH调节到2-3之间

    你一见我就笑2169(v2650137) 发表: 已经上传了附件,整理了详情,麻烦了。
    再请教一下,没有连质谱,离子对试剂考虑什么试剂?一般多大浓度?

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  • 你一见我就笑2169

    第10楼2018/08/01

    谢谢!我先尝试一下。再请教一下:一般什么情况下或什么样的分子,更适合选用离子对试剂呢?
    我之前的尝试,把精力都集中在了pH的影响,思路有些窄了。

    有水有渝(xky0230699) 发表: 离子对用己或庚烷磺酸钠都可以的,浓度先试一下3mmol/L的,pH调节到2-3之间

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