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【转帖】第十课液相色谱仪－检测系统

xxx816

2007/01/18

气相色谱（GC）

第十课液相色谱仪－检测系统
检测系统
高效液相色谱的检测器很多，最常用的有紫外检测器、示

差折光检测器和荧光检测器等。

(1)紫外检测器
紫外检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，适用有紫

外吸收物质的检测。在进行高效液相色谱分析的样品中，

约有80％的样品可以使用这种检测器。紫外检测器的工作

原理如下：由光源产生波长连续可调的紫外光或可见光，

经过透镜和遮光板变成两束平行光，无样品通过时，参比

池和样品池通过的光强度相等，光电管输出相同，无信号

产生；有样品通过时，由于样品对光的吸收，参比池和样

品池通过的光强度不相等，有信号产生。根据朗伯—比尔

定律，样品浓度越大，产生的信号越大，这种检测器灵敏

度高，检测下限约为 10(-10) g／ml，而且线性范围广，

对温度和流速不敏感，适于进行梯度洗脱。

(2)示差折光检测器
示差折光检测器是根据不同物质具有不同折射率来进行组

分检测的。凡是具有与流动相折射率不同的组分，均可

以使用这种检测器。如果流动相选择适当，可以检测所

有的样品组分。示差折光检测器分为反射式和沂射式两种。

反射式示差折光检测器是根据下述原理制成的：光在两种

不同物质界面的反射百分率与入射角和两种物质的折射率

成正比。如果入射角固定，光线反射百分率仅与这两种物

质的沂射率成正比。光通过仅有流动相的参比池时，由于

流动相组成不变，故其折射率是固定的；光通过工作池时

，由于存在待测组分而使折射串改变，从而引起光强度的

变化，测量光强度的变化，即可测出该组分浓度的变化。

偏转式示差折光检测器是根据下述原理：当一束光透过折

射率不同的两种物质时，此光束会发生一定程度的偏转，

其偏转程度正比于两物质折射率之差。示差折光检测器

的优点是通用性强，操作简便；缺点是灵敏度低，最小检

出限约为 10(-7)g/ml ，不能做痕量分析。此外，由于

洗脱液组成的变化会使折射率变化很大，因此，这种检测

器也不适用于梯度洗脱。

(3)荧光检测器
物质的分子或原子经光照射后，有些电子被激发至较高的能

级，这些电子从高能级跃至低能级时，物质会发出比入射光

波长较长的光，这种光称为荧光。在其他条件一定的情况

下，荧光强度与物质的浓度成正比。许多有机化合物具有天

然荧光活性，另外，有些化合物可以利用柱后反应法或柱前

反应法加入荧光化试剂，使其转化为具有荧光活性的衍生物

。在紫外光激发下，荧光活性物质产生荧光，由光电倍增管

转变为电信号。荧光检测器是一种选择性检测器，它适合于

稠环芳烃、氨基酸、胺类、维生素、蛋白质等荧光物质的测

定。这种检测器灵敏度非常高，其检出限可达10(-12)_10

(-13)g/ml，比紫外检测器高2—3个数量级，适合于痕量分析

。而且可以用于梯度洗脱。其缺点是适用范围有一定的局限性。

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