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液相色谱柱子堵了，而且压力变化很奇怪

sunnyyang177

2019/05/29

液相色谱（LC）

柱子是安捷伦c18 1.8微米 2.1*100 的规格
机器是安捷伦1290
流动相是乙腈， 0.1%磷酸水
样品是葛根提取的黄酮

1. 柱子刚买来一个月，总共进样不到10次。上一次跑样，压力值已经稳定了，开始运行程序（7%乙腈开始梯度），突然压力就飙升，然后就用甲醇冲一晚上，也不管用
2. 后来掺水冲，稍稍降下来一些，但比柱子刚买来时277bar（纯乙腈）还是高30bar左右
3. 给安捷伦技术打电话，建议我用10%乙腈冲，再用纯乙腈。我打开仪器，没想到最开始100%乙腈已经274bar了，我很震惊啊，我什么都没干它怎么自己降下来了。不过还是按照他说的来冲，结果！结果冲完了，纯乙腈变成403bar了！同样的条件，为什么它可以在307，274，403bar这些稳定值自由跳跃啊？？？
前前后后加起来冲了30个小时，鬼都能冲出来了好吧
求大神告知我怎么回事

之前没注意看说明书，说明书的例子里进样量是1微升2微升，我之前一直按10微升进样的，但之前没有出现过这样的问题，所以我觉得无关吧可能

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welewolf

第1楼2019/05/29

应助达人

进的实际样品有没有先过膜或者高速离心取上清液？

0

检测老菜鸟

第2楼2019/05/29

应助达人

我的意思是你还是用低浓度的甲醇水冲。乙腈冲完压力升高，说明里面的残留可能不溶于乙腈，可能还析出来了，还是低浓度甲醇水冲靠谱。

0

yangxiaoyang

第3楼2019/05/29

可以排查一下管路，有可能不是柱子堵了。我们做的时候经常会遇到压力飙高的情况，一般是在线过滤器堵或者是针座堵，柱子一般刚开始用很少会出现堵的情况。乙腈做流动相的话，建议做完先用大比例水冲。

0

Insm_a930cbf9

第4楼2019/05/30

先排查仪器管路是不是堵，再看色谱柱。

0

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