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乳制品中黄曲霉毒素M1的可视化半定量分析

  • Bladney
    2019/09/10
    PTS追踪团队
  • 私聊

食品毒素/微生物检测

  • 黄曲霉毒素是谷物污染的主要有毒真菌代谢物, 到目前为止,被人们发现的黄曲霉毒素已经超过 300 种。其中最常见的就是黄曲霉毒素 B1(AFB1),它也是哺乳类动物体内毒性最强的天然致癌物。 黄曲霉毒素 M1(AFM1)是 AFB1 在动物体内经过羟化而衍生成的代谢产物。哺乳动物通过摄入含有 AFB1 的谷物后,通过体内肝细胞内质网微粒体混合功能氧化酶 的作用下进行代谢,产生AFM1,而产生的 AFM1 能通过乳汁和尿液排出体外。

    图1

    在日常生活中,人们所饮用的奶制品,就极有可能由于超标的 AFM1 存在而严重威胁到人类的健康。虽然 AFM1 的毒性并没有它的母体化合物 AFB1 高,但是由于 AFM1 具有的细胞毒性和致癌效应以及高产量的奶制品对人们特别是婴儿以及幼儿生活的重要性使得其越来越受到研究人员的重视。世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)将它分类为一类致癌物质。许多国家设立了 AFM1 在奶制品中的最大残留量。在欧洲国家,欧盟委员会已经严格限定牛奶或 奶制品中的AFM1 的最大残留量为 50 ng/kg 或者 50 ppt。美国食品及药物管理局(FDA)则将 AFM1 的最大残留量规定为 500 ng/kg。目前,测定 AFM1 的分析方法主要包括薄层色谱法,液相色谱-质谱联用法等等色谱质谱法。但是在这里我们想要介绍一种更为简便,经济,便携的新型方法。这种方法是基于酶联免疫及金属纳米材料特性实现的一种可视化的分析方法。近年来,酶联免疫法在真菌毒素的检测方面有了突破的发展。酶联免疫法已经成功地用在牛奶中 AFM1 含量的测定。商业化的酶联免疫试剂盒已经能够稳定准确地检测出实际样品中 AFM1 的含量,他们的优点是操作简单、测定快速、不需要大型仪器。只是测定结果都是通过单一色彩的不同强度进行半定量的。而金属纳米材料的引入则很好地解决了这个问题。例如纳米金棒(GNRs),作为一种特殊的纳米材料,GNRs 因其各向异性而具有独特的横向表面等离子体共振和纵向表面等离子体共振性质。并且 GNRs 的纵向的等离子共振峰强烈依赖其长径比,这使得我们可以在一定波长范围内通过调节 GNRs 的长径比来获得不同的光学信号。而若能将GNRs的长径比的改变引入商业化的酶联免疫试剂盒,那么就能很好地改善试剂盒的色彩辨识度。
    图2是四种乳制品样品通过GNRs结合的AFM1酶联免疫试剂盒得出来的可视化结果。与标准比色卡对比,这四种乳制品中AFM1的浓度分别为0.015-0.025 ppb、0.045-0.08 ppb、0.015-0.025 ppb以及0.08-0.15 ppb。


    图2
    这种方法能够对不同含量的AFM1产生不同含量的氧化剂,导致GNRs被不同程度地刻蚀而呈现出丰富多彩不同色系的颜色(粉色,紫色, 蓝色,绿色,灰棕色)。并且这种方法具有很好的选择性和抗干扰能力,已经能够成功地运用于乳制品中 AFM1 含量的测定。这种多色酶联免疫法对比于传统 的酶联免疫法,省去了昂贵,大型的检测仪器,大大提高其便携性。
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  • welewolf

    第1楼2019/09/10

    应助达人

    简单实用高效,这种方法挺有意思的,学习了

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  • zyl3367898

    第2楼2019/10/02

    应助达人

    这个方法简单方便,实用性强。

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  • 苏微公司

    第3楼2019/11/01

    肉眼观察误差很大啊

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