【实战宝典】赛默飞新一代顶空TriPlus 500分析药品中的溶剂残留解决方案

新官人

2020/07/21

私聊

气相色谱（GC）

赵紫珺车金水王申赛默飞世尔科技（中国）有限公司

关键词：

TRACE1310 gc；TriPlus 500；中国药典（2015版）；溶剂残留

目标

药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。残留溶剂不仅没有疗效，其毒性和致癌作用还会对患者产生一定的伤害。

药品中常见的残留溶剂及限度见下表1，除另有规定外，第一、第二、第三类溶剂的残留限度应符合表1中的规定；对于其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制定相应的限度，使其符合产品规范、药品生产质量管理规范（GMP）或其他基本的质量要求。

表1常见溶剂的分类及其限量

赛默飞新一代的TriPlus 500顶空自动进样器采用创新设计的气动系统，并在顶空进样阀和gc色谱柱之间采用直接连接的方式。全新的设计给客户带来更精确的进样系统及出色的峰面积稳定性。此外，样品流量的不间断吹扫大大降低了样品及高沸点物质的残留风险，确保了系统的耐用性和数据可靠性。本文参考中国药典（2015版），采用新一代的TriPlus 500顶空自动进样器结合模块化的Trace 1310气相色谱仪，对常见的24种溶剂残留化合物进行分析，为客户提供性能优良的医药行业解决方案。

表2.水中11种溶剂残留标准品配置

仪器与耗材

Thermo Fisher Scientific™ TRACE 1310 气相色谱，配分流不分流进样口，FID检测器

Thermo Fisher Scientific™ Chromeleon 7.2数据处理系统 Thermo FisherScientific™TG-624SilMS 色谱柱(30×0.32mm×1.8 m，P/N：26059-3390)

Thermo Fisher Scientific™ gc进样口刃环（85%Vespel/15%石墨，P/N: 290VA192）

Thermo Fisher Scientific™ 20mL螺口顶空样品瓶（P/N: 20-HSV）

Thermo Fisher Scientific™ 20mL顶空样品瓶配套磁性螺纹盖（P/N: 18-MSC-ST201）

试剂与标准品

本实验中所用试剂均由Fisher公司提供。

工作曲线的制备

两组溶剂配置浓度如表2，表3所示，其中难溶于水的化合物溶解在N,N-二甲基甲酰胺中，易溶于水的则以水为溶剂。

表3.DMF中13种溶剂残留标准品

TriPlus500 – HS Parameters

Incubation Temperature (oC):	80
Incubation Time (min):	60
Shaking:	Fast
Pressurization Mode	Pressure
Vial Pressure (kPa)	130
Pressure Equilibration Time (min)	1
Loop/sample Path Temperature	80
Loop Filling Mode (kPa)	72.4
Loop Equilbration Time (min)	1
Needle Purge Flow	2
Injection Time (min)	1
Injection Mode	Standard

Trace 1310 gc Parameters

Inletmodule and mode: SSL split

SplitFlow (mL/min):40

PurgeFlow (mL/min): 5

CarrierGas (kPa): N2,2ml/min

OvenTemperature Program

Temperature(oC):

40oC hold 8min, 20oC/ minto 200 oC, hold 4min

Temperature(oC):

40oC hold 5min, 20oC/ min to 120 oC, hold 4min, 20oC/min to 200 oC, hold 3min

FID

Temperature(oC):250

AirFlow (mL/min) 350

H2(mL/min) 35

N2(mL/min) 40

结果与讨论

采用上述仪器方法对标准品level 1-level 5依次进样分析，考察各组分在相应浓度范围内的线性，稳定性及加标回收。具体谱图与数据汇总如下：

图1.水中溶剂残留Level5标准溶液色谱图

图2.水中溶剂残留连续进样色谱图叠加

表4.水中溶剂残留实验结果及药典验证指标

注：分离度为n.a.表示该峰后面没有其他峰；RSD为连续进样8针Level3标准品结果。根据药典要求，分离度指标为1.5，塔板数指标为5000，峰面积RSD指标为10%

图3.水中11种溶剂残留标准曲线图

实验结果表明水中11种组分分离度和峰型良好（见表4，图1），在标准品范围内线性相关系数均大于0.999（见表4，图3）。对 level 3标准溶液连续进样8针，RSD分别为0.20-1.61%之间，重复性良好（表4，见图2）。以三倍信噪比（S/N=3）计算各化合物的检出限，各组分仪器检出限在0.01-0.85μg/mL之间（见表4）。

图4.DMF中溶剂残留Level5标准溶液色谱图

图5.DMF中溶剂残留连续进样色谱图叠加

表5.DMF中溶剂残留实验结果及药典验证指标

序号 No.	化合物Peak Name	药典限值Limit(ppm)	保留时间Ret.Time	峰面积 Peak Area	拖尾因子Asym.	分离度Resol.	塔板数Plates	线性范围(ppm) Range of linearity	R2/%	LOD (SN=3)	LOQ (SN=10)	RSD
1	trans-1,2-Dichloroeth-ene	1870	4.548	1.4969	1.02	4.9	37858	12-240	0.9999	0.05	0.15	0.46%
2	Hexane	290	5.057	1.3166	1.01	9.39	31265	1.2-24	0.9998	0.01	0.02	1.09%
3	cis-1,2-Dichloroeth-ene	1870	6.173	0.5558	1.02	9.2	116682	6-120	0.9999	0.05	0.16	0.36%
4	Cyclohex-ane	3880	6.855	6.8188	1.00	2.45	129007	8-160	0.9999	0.01	0.02	0.69%
5	Benzene	2	7.185	0.0361	0.97	5.7	208131	0.16-3.2	1.0000	0.02	0.06	1.74%
6	Methylcy-clohexane	1180	8.087	4.5977	1.00	17.39	275959	8-160	0.9999	0.01	0.02	0.52%
7	Toluene	890	9.045	0.9926	1.02	13.46	546322	8-160	0.9999	0.03	0.08	0.50%
8	Butyl ac-etate	5000	9.768	0.3056	1.03	4.02	440805	8-160	0.9999	0.10	0.33	0.74%
9	Chloroben-zene	360	10.53	0.0535	1.00	1.53	419255	2-40	0.9999	0.15	0.51	0.90%
10	Ethyl ben-zene	2170	10.63	0.5181	1.02	2.2	409922	8-160	0.9999	0.07	0.22	0.74%
11,12	m,p-Xylene	4340	10.79	0.9984	0.99	6.64	297253	16-320	0.9999	0.08	0.27	0.81%
13	o-Xylene	2170	11.312	0.3885	1.02	4.69	333762	8-160	0.9999	0.10	0.35	0.89%

注：分离度为n.a.表示该峰后面没有其他峰；RSD为连续进样8针Level3标准品结果。根据药典要求，分离度指标为1.5，塔板数指标为5000，峰面积RSD指标为10%

图6.DMF中13种溶剂残留标准曲线图

由图4, 5, 6及表5 可以看出，DMF溶剂中13种组分分离度和峰型良好，线性相关系数均大于0.9998。对level 3标准溶液连续进样， RSD分别为0.36-1.74%之间，重复性良好。以三倍信噪比（S/N=3）计算各化合物的检出限，各组分仪器检出限在0.01-0.15μg/mL之间

结论

以上测试结果证明，采用赛默飞世尔TRACE 1310气相色谱仪，结合全新的TriPlus500顶空自动进样器，在医药溶剂残留测试中给出了出色的表现，完全符合并超出中国药典的测试需求。

• 创新的气动控制系统和样品流路的超惰性设计确保了分析结果的重复性及精确度。这一点通过极好的进样峰面积重复性0.20-1.74%（连续8针进样，平均0.61%）得到了验证;

• 高灵敏的FID检测器与TraceGOLD TG-624色谱柱并用，将所有化合物得到了完美的分离（Rs>1.5）；

• 出色的线性结果（所有化合物R²>0.9992）为药物的溶剂残留日常定量分析，提供了准确度保证；

• 从仪器控制到报告输出，均采用变色龙CDS软件。保证数据完整性、可溯性，以及有效地数据管理所有的数据结果均可表明TriPlus 500顶空自动进样器可以提供无与伦比的性能，继而为实验室的日常分析提供可靠、稳定的结果。

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