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【实战宝典】更换色谱柱时的注意事项有哪些？

小官人

2021/03/22

液相色谱（LC）

解答：（1）在使用液相色谱时，应特别注意“柱外效应”对分析结果的影响。由于样品分子在液体流动相中的扩散系数比在气体中小4~5个数量级，液体流动相的流速也比气相慢1~2个数量级。因此，样品进入色谱柱后，在柱子以外的任何死体积（进样器、柱接头、连接管、检测器）中，样品分子的扩散和滞留，都会引起色谱峰的展宽，而使柱效降低。为使柱外效应减至最小，获得理想的分析结果，仪器的流动相管路连接非常重要。

（2）现在柱接头采用的是低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一般一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管连接，3/16英寸的内螺纹与1/16英寸的连接管连接，中间都放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉，压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上。

（3）在柱接头两端内部各有一片不锈钢滤片，用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。色谱柱各组件均为不锈钢材质，能耐受一般的溶剂。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂。

（4）要注意按柱管上标示的流动相流向，一般色谱柱入口接头为不锈钢卡套接头，色谱柱出口为不锈钢卡套接头或PEEK管线手拧街头，连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。当完成第一次安装后，不锈钢卡套已固定死，当接不同的色谱柱时，要注意色谱柱接头处的形状和长度，否则会产生一个非常大的死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底，顺时针拧紧空心螺钉后，再用扳手继续顺时针拧1/4~1/2圈，记不要用力过大。如果色谱柱通过流动相加压后有漏液现象，继续顺时针拧1/4圈，直至不漏液为止。

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