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【实战宝典】碱性化合物分离时前沿峰如何解决？

小官人

2021/03/24

液相色谱（LC）

问题描述：新色谱柱分离生物碱，流动相pH=10，分离时前几个峰严重前沿，之后的峰分离度和对称因子均较好。这种情况该如何解决呢？

解答：（1）因柱子是新柱，首先柱效降低导致峰型不好就可以排除掉，那么我们要检查是否是目标物超载导致的前沿峰，可以通过两个步骤来进行，第一步是直观经验判断，看峰的响应值是否较大，是否出现平头峰，峰高是否较高等，我们发现前三个峰有出现平头峰的现象，那么就进行第二步，减少进样量，排除过载这个因素，但减少进样量之后，依旧存在前沿峰的现象。

（2）检查是否因未用流动相溶解样品而导致的前沿峰。尤其是强溶剂溶解样品进样而导致的前沿峰，也就是我们常说的液相检测中的溶剂效应，会出现类似色谱图上较早洗脱的前沿峰而较晚洗脱的峰较为正常的情况。

（3）检查是否流动相组成、比例等导致的前沿峰。如果未使用缓冲盐体系的可以根据化合物的性质加入酸、碱、缓冲盐等进行调节，如果已使用了缓冲盐体系，则可以通过更改缓冲盐的比例及浓度进行调节。

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