第3楼2022/01/25
氨基柱其本质属于正相柱,要求乙腈的含量不得低于60%,因为氨基柱在水相比例过多的情况下是很不稳定,对氨基柱是有损害的;同时氨基柱也不宜在强酸的环境下。使用氨基柱时需要注意以下事项:①反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险,最理想的pH范围在pH3.0-7.0:②流动相一定要过滤,色谱级的乙腈,水相采用0.22um的滤膜过滤的超纯水。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出;③色谱柱的冲洗:流动相如果含有缓冲盐,实验分析完毕之后,用不少于缓冲盐比例的纯水/乙腈冲洗至少20倍柱容量,但要注意纯水比例不宜超过40%(例如用的流动相是20%的缓冲液,则可以用25%比例的纯水将缓冲盐缓慢洗脱出来),再用100%乙腈冲洗至少10倍柱容量,并保存在100%乙腈中; ④色谱柱的保存反相使用时,如短期不用,可用乙腈保存;长期不用时最好用异丙醇充分置换,最后用正己烷保存;
⑤ 使用保护柱。