液相色谱柱活化目的

应助达人

新装色谱柱在使用前要进行老化处理，其目的是取出残留的溶剂、水分和低沸点杂质，同时也使固定液在载体表面形成均匀的膜。不老化对柱效等有影响。

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买来的液相色谱柱在出厂的时候都经过一些测试，里面残留有测试时的一些溶剂或者其它杂质，从出厂到使用间隔的时间有长有短，不固定。在使用之前对买来的新色谱柱进行活化一来可以去除原先里面残留的杂质溶剂，二来可以获得更高的柱效

液相色谱在用于食品、药品、生物样品、环境污水等物质中有机物的分析时，如出现样品提取净化效果不佳、操作不当或者流动相不合适等情况，液相色谱柱常常会出现污染、固定相受损等现象，从而导致液相色谱柱出现柱效降低、理论塔板数减少、分离效能降低或出现影响定性定量的鬼峰等问题。在日常使用过程中，液相色谱柱的活化可以实现恢复色谱柱的效能、减少色谱柱中残留杂质的作用。
新购买的色谱柱在使用前一般都要进行活化操作。不活化也不一定会有问题，从保护柱子提高柱效的角度最好还是活化。

主要是置换保存的溶剂。

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新柱活化，实际上是一个平衡的过程，除了用流动相平衡外，有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是测定分子量比较高的多肽，尤其重要。因为分子量高的物质分子，扩散速度慢，平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简单，多进几次样品，直到峰面积和保留时间稳定，再进行正式进样测定。
如果要加快平衡时间，把前面用来平衡的进样样品浓度加大，或者不等洗脱完成，连续进样多针。用待测物对新柱平衡，目的是将硅胶基质填料表面具有非特异性吸附的位点的吸附能力饱和掉。

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我的理解，现在的色谱柱其实都很好了，活化这个词可能是从气相色谱上老化嫁接过来的，这个词在专业的液相色谱书籍中也很少提到，主要是用新的保存液置换一下或用过渡溶剂过渡一下再上流动相即可，如C18柱用90%甲醇冲洗30分钟。