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【求助】有关up-conversion fluorescence spectra用F4500如何实验??

  • crystalcff
    2007/04/20
  • 私聊

分子荧光光谱

  • Downconversion luminescence spectra were recorded with a Hitachi F-4500 fluorescence spectrophotometer.
    Upconversion fluorescence spectra were obtained on the Hitachi F-4500 fluorescence spectrophotometer with a 0-800 mW adjustable laser (980 nm, Beijing Hi-Tech Optoelectronic Co.,China) as the excitation source, instead of the xenon source in the spectrophotometer, and with a fiber optic accessory.
    upconversion fluorescence spectra 的测试方法是否同普通的荧光光谱测试方法相同!所谓光源使用的可调激光具体怎么操作
    望有过这方面操作经验的达人现身说法!
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  • water666

    第1楼2010/08/10

    :开 机


    1. 将 Power 键按至 〝 On 〞 的位置,热机十分钟。
    2. 按下 Xe Lamp 的 〝 Start 〞 钮,启动 Xe Lamp ,三秒内如果 Xe Lamp 指示灯没亮,则放开该按钮,十秒后再重新按下 Xe Lamp 的 〝 Start 〞 钮,启动 Xe Lamp ,直到 Xe Lamp 指示灯亮起。
    3. 按下主开关 Main 钮至 〝 On 〞 的位置。
    4. 按下计算机的电源开关﹝ 在主机的右下角 ﹞。
    5. 在桌面点选FL menu,并启动initialize和计算机联机,计算机自动和仪器联机。
    6. 联机成功后,出现功能选单 Menu Select。
    B:激发及放射之最大波长扫描 (Slit:5 nm / 5 nm)
    1. 在功能选单 Menu Select 中,选择 Wavelength Scan 后,以鼠标按下 〝Run〞后,出现 Ex Scan 的窗口。
    2. 拉下 Parameter 之功能选单,选择 Scan parameters ﹝ 或按下 F2 键 ﹞以进入 Scan parameters 的窗口。
    3. 在 Scan Mode 选 Excitation
    在 Data Mode 选 Fluorescence
    在 Scan Speed 选 1200 nm / min
    在 EX Start WL 输入 300 nm
    在 EX End WL 输入 600 nm
    在 Ordinate Maximum输入3000
    在 Ordinate Minimum输入 0000
    在 EM Start WL 输入 450 nm
    以鼠标按下〝OK〞键。
    4. 拉下 Scan 之功能选单,选择 Start Scan ﹝ 或按下 F5 键 ﹞,开始扫描。
    5. 扫描结束后,拉下 Data Processing之功能选单,选择 Peak 后,再选择 Peak / Valley Cursor 后,按下〝RUN〞键。
    6. 按下鼠标移动 Cursor 到最大之吸收峰处,计录屏幕右上角之 EX 波长值为激发之最大波长﹝例如350 nm﹞。
    7. 拉下 Data Processing之功能选单,选择 Peak 后,以结束数据分析。
    8. 拉下 Data Processing之功能选单,选择 Peak 后再选择Print peaks,按下〝RUN〞键,即可印出扫描光谱图出来。
    9. 拉下 Parameter 之功能选单,选择 Scan parameter ﹝ 或按下 F2 键 ﹞以进入 Scan parameter 的窗口。
    10. 在 Scan Mode 改选 Emission
    在 Data Mode 选 Fluorescence
    在 Scan Speed 选 1200 nm / min
    在 EM Start WL 输入 300 nm
    在 EM End WL 输入 600 nm
    在 Ordinate Maximum输入3000
    在 Ordinate Minimum输入 0000
    在 EX WL 输入先前计录之激发最大波长,﹝例如350 nm﹞。
    以鼠标按下〝OK〞键。
    11. 拉下 Scan 之功能选单,选择 Start Scan ﹝ 或按下 F5 键 ﹞,开始扫描。
    12. 扫描结束后,拉下 Data Processing之功能选单,选择 Peak 后,再选择 Peak / Valley Cursor 后,按下〝RUN〞键。
    13. 按下鼠标移动 Cursor 到最大之吸收峰处,计录屏幕右上角之 EM 波长 值为放射之最大波长﹝例如450 nm﹞。
    14. 拉下 Data Processing之功能选单,选择 Peak 后,以结束数据分析。
    15. 拉下 Data Processing之功能选单,选择 Peak 后再选择Print peaks,按下〝RUN〞键,即可印出扫描光谱图出来。
    16. 按下窗口左上角之方形控制钮,拉下功能选单,选择 Menu Select 回到主选单。
    C:荧光测定 (Slit:5 nm / 5 nm)
    1、 在Menu Select 回到主选单。
    2、 选择 Photometry 并按下 RUN。
    3、 拉下 Parameter 之功能选单,选择 Scan parameters ﹝ 或按下 F2 键 ﹞以进入 Scan parameter 的窗口。
    4、 在 Wavelength (EX) WL 输入激发之最大波长﹝例如350 nm﹞。
    在 Wavelength (EM) WL 输入放射之最大波长﹝例如450 nm﹞。
    在 Maximum输入5000
    在 Minimum输入 0000
    以鼠标按下〝OK〞键。
    5、 拉下 Scan 之功能选单,选择 Scan。
    6、 放入 Blank ( 0.05 M H2SO4) 后,按下 〝Blank〞 测量Blank值,三次。
    7、 取出blank,放入Standard 后,按下 Scan测量( 每个样品测三次,取平均值。)
    8、 测完一个 Standard 后,依序放入其它Standard,重复步骤7直到最后一个 Standard 及Sample后,计录所有Standard及Sample的荧光值后,按下〝END〞键以结束实验。
    D:关 机
    1、 关闭 Photometry 窗口到 Menu Select 窗口。
    2、 关闭Menu Select 窗口。
    3、 关闭 Program Manager。
    4、 关闭计算机。
    5、 关闭 Main 键。
    6、 关闭 Power。开机顺序:

    (1)开机前首先确认主机两个开关:POWER/MAIN均处于关闭状态(搬向O处)。先接(2)通电源开关(POWER),5秒钟后再按下氙灯点灯按钮,当氙灯点燃后
    (3)再接通主开关(MAIN)。此时主开关上方绿色指示灯连续闪动三下。, v* L;
    (4)接通电脑及打印机电源,Win98开始建立,随后F-4500操作界面自动进入。
    (5)按界面提示选择操作方式。

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  • fragr

    第2楼2010/09/05

    软件设置采用 发光模式;关掉氙灯或在入射口用黑色板挡住;

    样品放置需要采用特殊的夹具,光路是从发射侧顺时针90°-----激光器入射;

    激光器最好采用光纤口,易于固定。

    样品面和入射光不要采用45°,避免激光对检测器的伤害;

    狭缝从小到大调整;

    最好有校正光谱选择

    crystalcff(crystalcff) 发表:Downconversion luminescence spectra were recorded with a Hitachi F-4500 fluorescence spectrophotometer.
    Upconversion fluorescence spectra were obtained on the Hitachi F-4500 fluorescence spectrophotometer with a 0-800 mW adjustable laser (980 nm, Beijing Hi-Tech Optoelectronic Co.,China) as the excitation source, instead of the xenon source in the spectrophotometer, and with a fiber optic accessory.
    upconversion fluorescence spectra 的测试方法是否同普通的荧光光谱测试方法相同!所谓光源使用的可调激光具体怎么操作
    望有过这方面操作经验的达人现身说法!

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