4.质谱技术 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight- mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)是20世纪80年代发展起来的一种汉进分析大分子的方法,现已广泛应用于生命科学及相关领域,是检测和鉴定蛋白质、多糖、核酸等生物分子的有力工具。用质谱技术对微生物进行鉴定,是对传统的基于生化及表型测定鉴定微生物方法的补充,也是临床微生物鉴定技术发展的一个新里程。也有人预言,MALDI-TOF-MS 将取代传统的生化鉴定法,成为临床微生物实验室进行微生物鉴定的主要技术。分析前,待测样品与化学基质一起点种在样品盘上,所选择的基质在仪器的测定波长能有良好的吸收。点种完后,样品盘被放入样品解析/电离室,样品与基质的混合物接收激光脉冲照射,使基质活化。样品分子被活化的基质分子、水和离子所包围。一旦吸收,基质便将自身的质子传递给样品分子,使样品分子在气化状态均带正电荷。在电离室电场的作用下样品分子加速通过,且速度与质荷比相关。粒子通过电离室后进入飞行时间质谱分析器,在这里,带电粒子沿着无电场的路径飞行,最后到达粒子检测器。具体的飞行时间由粒子检测器测得。从飞行时间可以计算出每种粒子的质荷比,从而绘出样品复合物的质谱图。