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【金秋计划】+色谱柱使用寿命
memory光阴
2024/09/11
私聊
液相色谱(LC)
色谱柱使用寿命大约为
1000针,而保护柱的寿命大约为280针。主要受色谱条件及保存条件影响。表现形式:柱压升高、柱效降低、峰形拖尾、峰形变宽、保留时间发生变化、固定相流失等。
1、色谱条件,有两种基本情况:
(
1)在相同实验中,以前使用的色谱柱寿命长很多,这种情况,应该检查一下色谱条件是否保持一致。样品的组成,样品中强吸收的污染物会破坏色谱柱的柱
效。或者管路的密封圈是否完好?脱落的密封圈会堵塞色谱柱过滤器和填料的顶层,从而影响样品的分布。如果可以确认色谱条件没有变化,那么可以推测是柱床松动的原因。在实验室和运输过程中色谱柱剧烈的震动都会导致柱床松动;
(
2)在本实验中用过的所有的色谱柱在使用相同次数后全部损坏,最大可能是样品中的成分吸附在色谱柱的顶端。可能是在流动相中不溶的沉淀物或者是强吸收的物质;
(
3)采用合适的样品准备技术处理样品。用和分析柱相似的固相萃取柱进行固相萃取(SPE);
(
4)使用保护柱。保护柱是作为牺牲柱装在色谱柱前使用的,出现问题的时候就会被替换掉。保护柱的填料和装填技术必须和分析柱一样;
(
5)反冲柱子。反现在的装填技术可以使柱子承受反冲,能更好的去除柱头端的污染物。
2、使用方法不对,按照生产商的说明使用柱子的话一般很少发生
(
1)流动相pH超出使用范围,导致的柱子键和相水解或基质溶解。样品用强酸或强碱溶解的话也会发生;
(
2)高温也会导致色谱柱损坏,如高温会加速键合相溶解;
(
3)特殊柱子注意事项,例如氨基柱可以和醛,酮反应。氨基柱在不含缓冲盐的水溶液中会显强碱性,分解部分硅胶;
(
4)暴露在错误溶剂中的柱子也会发生坍塌。因为这些柱子是基于非常松散的结构。他们是因颗粒之间的黏着而部分的结合在一起的。如果置于能破化这种黏着的流动相中,柱床很有可能会坍塌。氰基柱在中性溶液,苯基柱在THF中有时就会发生这种问题。这也是不要冲洗柱子的另一个理由。
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