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紫外可见分光光度法总结
viki
2024/10/11
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化学药检测
1.定义与应用
190~800nm测吸光度,用于鉴别、杂质检查、含量测定。原理:分子外层电子跃迁导致紫外吸收,决定于电子结构。
2.仪器结构
光源(气灯、碘钨灯)、单色器(狭缝、棱镜/光栅)、样品室、检测器等。单/双光束仪器分类,双光束更自动化。
3.检定
波长准确度(±1nm紫外,±2nm可见),用汞灯、气灯、氧化钦玻璃等检定。吸光度准确度,用重铬酸钾硫酸溶液检定。杂散光检查,按规定试剂和浓度配制溶液测定。
4.操作方法
在规定吸收峰±2nm测吸光度,核对吸收峰位置。性状项下测吸收系数。鉴别:测最大/最小吸收波长及吸光度比值。检查:利用吸收光谱差异查杂质。含量测定:对照品比较法、吸收系数法、计算分光光度法(少用)、比色法。
5.记录与计算
记录仪器型号、溶剂、吸收池配对、称量、溶解稀释情况、吸收峰波长、狭缝宽度、测定波长及吸光度。
6.注意事项
:使用检定校正的量瓶、移液管。石英吸收池洁净配对,注意取放、擦拭、保存。溶剂末端吸收强,使用范围不小于截止波长,检查溶剂符合要求。称量、配制按药典规定,溶液浓度适中(吸光度0.3~0.7)。吸收系数法含量测定时,吸收系数>100,注意仪器校正。狭缝宽度<吸收带半高宽10%,或减小至吸光度不再增。制剂含量测定时注意pH值一致。
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