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吸收定律是一个有限的定律

5m2000

2004/11/30

紫外可见分光光度计（UV）

吸收定律是一个有限的定律
最近看到一个帖子，问吸光度指标在多少范围好？简单地说，吸光度A在0.2—1.4范围内和浓度C之间的线性关系较好。浓度越高误差越大。原因是多方面的。
1. 吸收定律基本性质的限制
A＝abC 这是朗伯—比耳定律。其中比耳定律部分表示吸光度(A)和浓度(C)之间呈线性关系。但这只适用于稀溶液时才成立。在高浓度时吸收成分之间的平均距离缩小，临近质点间电荷分布互相受到影响，同时改变了他们对特定辐射的吸收能力。此现象使得A—C的线性关系发生偏差。浓度越高，偏差越大。
此外，定律的偏差还与溶液的折射率有关。溶液的吸光系数a和折射率有一定的函数关系，而折射率是随浓度变化的。这是偏差造成的另一原因。
当然，采用适当的方式仍可在高浓度时进行定量分析，如差示光度法等。
2. 实际条件的偏离
吸收定律有四个隐含的假设。1），光和被测成分之间的相互作用只是光被成分吸收。2），采用“单色光”。3），吸收成分相互无关，而不论数量和种类。4），吸光要限于同样的光程和横断面。实际情况并不是这样，四个假设均会出现偏差。
1).荧光，磷光和散射都会引起不同程度的“非真”吸收。荧光，磷光可以加适当的滤光片滤除。而散射的问题就比较复杂，不容忽视。
2).所有的单色器均不能输出真正的单色光，只是宽窄不同。所以对吸收的影响也不同。此外，不同的物质其吸收峰宽度是不同的。因此仪器的光谱带宽亦成为分析工作者十分重视的一项指标。
3).不同组分的物质同时出现在被测溶液中的情况是十分普遍的。当浓度增大时往往产生某些附加效应，如凝聚，聚合，水解等，从而影响物质的吸光效应。
4).光程的不一致性是引起吸光度偏差的另一原因。多数仪器通过样品池的光是不平行的。而为了得到足够光强，光束必须有一定孔径角。计算证明，入射孔径角为10度时，即会产生0.3%的吸收误差。此外，池壁的平行度，光洁度，光的内反射，干涉等都可能引起不同程度的吸光度偏离。
3.测试过程中产生误差
采用分光光度法进行定量分析的过程中，均可能产生化学的误差，仪器的误差以及人为的误差。有经验的分析工作者都会采取相应的措施，以减少这些误差。这里不再过多的累述。

总之，光度法测量样品浓度会随浓度的增大而出现线性偏差，绝大多数是向下偏离。因此采用一组标准浓度溶液作出二次标准曲线，以此标准曲线对照测出样品浓度的方法，即可较好地减少测量偏差。

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第1楼2004/11/30

不错!

0

第2楼2004/11/30

很用心，自己总结的？谢谢！！！

0

第3楼2004/12/18

好贴顶一下。
很多人都不知道这些。

0

第4楼2004/12/26

很有意义，建议大家多多鼓励支持。

0

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