2×HYK GC Buffer(with 4mM MgSO4)

2×HYK GC Buffer(with 4mM MgSO4)

参考价:¥50
供货周期: 一周
品牌:
规格: 60次
货号: B001
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深圳华因康基因科技有限公司
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产品详情

 概述

    2×HYK GC Buffer(with 4mM MgSO4)是使用Long Taq DNA Polymerase扩增具有复杂的二级结构模板(例如GC Rich、重复序列等)时的推荐PCR反应Buffer;该产品与华因康 Long Taq DNA Polymerase(EN1011S/EN1011L)中附带的2×HYK GC Buffer(with 4mM MgSO4)完全相同。

保存

   -20℃低温保存。

产品应用

    配合HYK Long Taq DNA Polymerase(EN1011S/EN1011L)扩增具有复杂的二级结构模板(例如GC Rich、重复序列等)。

注意事项

  1. 使用2×HYK GC Buffer(with 4mM MgSO4)进行PCR扩增时,建议使用Tm值较高的引物。
  2. 在常规PCR Buffer扩增失败情况下,使用本公司的2×HYK GC Buffer(with 4mM MgSO4),成功扩增2031bp的GC含量在70%的DN**段。
  3. PCR的反应体系请在冰上配制,然后置于预热至变性温度下的PCR反应仪上进行PCR反应,可增强PCR扩增的特异性。
  4. 由于2×HYK GC Buffer和一般的PCR用Buffer相比DNA变性效果较强,因此简单的DNA 模板使用2×HYK GC Buffer(with 4mM MgSO4)进行PCR扩增时,有时会降低PCR的扩增效率,此时推荐用常规的PCR Buffer。

应用实例

以Thermus thermophilus菌液为模板扩增DN**段(2031bp、GC含量70%)。

1. 反应体系如下:

组分

用量

Thermus thermophilus菌液

0.3μl

Forward Primer

10pmol

Reverse Primer

10pmol

dNTP(10mM each)

1μl

2×HYK GC Buffer

25μl

Long Taq DNA Polymerase(5U/μl)(EN1011)

0.25μl

ddH2O

Up to 50μl

2. PCR反应条件:

温度

时间

循环数

94℃

7min

1

94℃

30s

30

58℃

30s

72℃

2min

72℃

10min

1

4℃

1

 3. 结果:

 

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