T4 DNA 连接酶

T4 DNA 连接酶

参考价:¥360
供货周期: 一周
品牌:
规格: 40000U—200000U
货号: EN5001
CAS号:
深圳华因康基因科技有限公司
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产品详情

 概述
       该酶催化契合的双链DNA或RNA的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口,但对单链DNA或RNA无连接作用。
 
应用
  
    1.TA克隆。

    2.粘性末端和平齐末端均可连接。
    3.限制性酶切片段的克隆。
    4.将linker或adapter连接到DN**段的平齐末端。

来源
    E.coli重组表达。
 
活性单位定义(Cohesive End Unit
    1CEU指在20μl 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中,在16℃反应条件下,30min能使50%的经Hind III 消化的λDN**段[5 端浓度为0.12μM(300μg/ml)]连接所需的酶量。

质量控制
    双链内切脱氧核糖核酸酶检测:50μl反应体系中,1μl酶和1μg pUC57,37℃孵育4h,0.8%琼脂糖凝胶检测。结果显示无切口或线性DNA存在,表明该产品通过此项测试。
    内切及外切脱氧核糖核酸酶活性检测:20μl反应体系中,包含200ng双链的寡核苷酸,1 μl酶,37℃孵育4h,反应产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测并成像分析实验结果。结果显示寡核苷酸没有降解,表明该产品通过此项测试。
    DNA 末端完整性和克隆效率污染活性的检测:将200ng pUC57酶切片段混合物(pUC57/HindⅢ,pUC57/PstⅠ,pUC57/SmaⅠ),1μl酶,37℃孵育4h,转化后进行蓝白斑筛选。白斑比例低于3%时,产品合格。

 

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