供货周期: | 一周 |
品牌: | |
规格: | 50—100次 |
货号: | KT4002 |
CAS号: |
产品介绍
华因康DNA 凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit),是一种用于从DNA 琼脂糖凝胶中回收目的DNA 的试剂盒。
本试剂盒采用了溶胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA 能在离心过柱的瞬间,结合到DNA 纯化柱上,在一定条件下又能将DNA 充分洗脱,从而实现DNA 的快速纯化。无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,只需不足20 min即可完成。每个DNA 纯化柱可以结合的DNA 量的上限约为15ug。
试剂盒组成
组成名称 | KT4002-01 | KT4002-02 |
溶液I(融胶液) | 40ml | 80ml |
溶液II(洗涤液) | 20ml | 40ml |
溶液III(洗脱液) | 10ml | 20ml |
DNA纯化柱 | 50 | 100 |
2.0ml溶胶管 | 50 | 100 |
1.5ml收集管 | 50 | 100 |
说明书 | 1份 | 1份 |
使用范围与技术指标
适用于从DNA 琼脂糖凝胶(agarose gel)电泳后割取的含有目的DNA 的凝胶块中快速提取DNA。该目的DNA 通常为PCR 产物、质粒DNA 酶切出来的DNA 片断、超螺旋质粒DNA 单酶切后的线性化产物和DNA 连接产物等。本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA。长至30 个碱基的引物均可被完全去除。DNA 回收效率通常为60-90%。接近100bp 或10kb 的DNA 片断回收效率要略低一些,大于10kb的DNA 回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA 含量特别低(小于500ng)也会导致回收效率下降。
本试剂盒纯化所得DNA 可直接用于酶切,连接,转化细菌,测序,PCR,杂交等后续操作。
Lane M:1kb DNA Marker
Lane 1:胶回收前的2.7kb DN**段
Lane 2:胶回收后的2.7kb DN**段
注意事项
1. 溶液II使用前加入4倍体积无水乙醇。
2.溶液I对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。
3.本试剂盒所有操作均在室温进行。
4.废液收集管在一次回收中需多次使用,切勿中途丢弃。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1.回收后,称重,将胶切碎或在离心管内用EP枪头捣碎。
2.凝胶浓度1.0%~1.5%,加入2倍凝胶重量的溶液I;凝胶浓度1.5%~2.0%,加入不低 于3倍凝胶重量的溶液I,颠倒混匀。
3.50-60℃水浴加热约6-10min至胶全溶期间,需颠倒混匀3-4次,以加速凝胶溶解。如果胶碎片较小,3-5min即可全溶,凝胶碎片较大则需较长时间。
4.将溶化好的溶液全部加到DNA纯化柱内(每次可加700μl,如果体积较大,可多次上柱)。
5.离心机8,000rpm离心1min,倒弃收集管内的液体。(注意:第一次过柱离心后的溶液可回倒一次再次离心,有助于提升回收效率。)
6.在DNA纯化柱内加入750μl溶液II,放置1分钟。8,000rpm离心1min,洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
7.再加入500-750μl溶液II,离心1min,进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
8.离心机13,000rpm离心2min,除去残留液体。
9.将DNA纯化柱置于1.5毫升离心管上,放置2min,让残留的乙醇充分挥发。
10.加入50μl的溶液III至回收柱白色DNA附着膜上,放置1min。溶液III需要直接加至管内柱面中央,使液体被纯化柱吸收。可用TE或水(PH>7.0)替代溶液III。
11.离心机13,000rpm离心2min,所得液体即为高纯度DNA。
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