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含量测定 展开
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鉴别 展开
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前处理 展开
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限度检查 展开
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理化性质 展开
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注射剂及特殊剂型相关 展开
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微生物相关及生化特性 展开
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机械性能 展开
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组学研究 展开
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临床前研究 展开
参考标准
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肽谱分析是表征生物治疗蛋白质不可或缺的工具，该方法广泛运用于生物药物蛋白质的生产过程，以确保产品在各生产阶段的完整性和稳定性。利用 LC/MS 进行肽谱分析是表征肽段修饰的首选技术。稳定且重现性高的 LC/MS 方法，是成功实现肽谱分析分离的关键。因此，需要对 LC/MS 分离参数进行全面的研究。分析复杂蛋白质酶解物的过程中，如何实现肽段的高效、高分离度分离是一项巨大的挑战。甲酸是一种兼容质谱的离子对试剂，常用于 LC/MS 方法中，可实现灵敏检测。然而，甲酸也会导致峰形展宽，从而使肽段发生共洗脱。除此之外，流动相含甲酸的现有 LC/MS 方法具有峰容量小、峰展宽以及对相似肽段分离度差的限制。选择正确的反相色谱柱和 LC/MS 方法，对肽谱分离的成功十分重要。Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱专为高效的肽段分离而设计。HPH Poroshell 填料包覆了一层带正电荷的改性表面基团。采用 C18 配基的表面多孔颗粒填料表面带电，可改善峰形并提高峰容量。最佳孔径 (120 Å) 和粒径 (2.7 μm) 能够以低色谱柱反压提供类似 UHPLC 的性能。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱还可以与含甲酸的流动相兼容，在与质谱联用时可提供出色的峰形。 ?本应用简报展示了 AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱在用含甲酸的流动相对单克隆抗体 (mAb) 进行肽谱分离时显示出的卓越性能。本文通过研究流速、梯度时间和温度等不同的填料影响因素，开发出了实现最佳肽段分离的 LC/MS 方法。并对峰容量、峰宽、峰面积、峰高、重现性和序列覆盖率等肽谱分析的关键要素进行了评价。方案
生物治疗蛋白质中肽谱分析检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
检测仪器 Agilent 6545 Q-TOF LC/MS 液质联用系统 外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
检测仪器 1290 Infinity II -
由于聚集体会对药物安全性产生显著影响并且可能引发抗原反应，因此蛋白质聚集是生物治疗药物蛋白质的关键质量属性。聚集体还可能会降低生物治疗药物的药效并大幅降低生产工艺的经济效益。蛋白质通常在暴露于压力条件下时发生聚集，例如pH、温度或浓度的变化，因此不同生产阶段均有可能发生聚集。目前人们已经确定选择体积排阻色谱(SEC) 方法进行聚集体的定量分析。 在生物治疗药物开发过程中（例如在克隆选择过程中或在通过严格的“实验设计”法优化发酵条件时）监视聚集体的形成情况，这些过程可能产生大量需要进行体积排阻分析的样品。 SEC 常用条件的分析时间往往需要20 min 甚至更长，这极大限制了对大量样品的分析能力。Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱具有高度优化的粒径和孔径设计，可实现更快速的分离，从而显著减少分析瓶颈问题。本应用简报介绍的技术可提高样品通量而不影响分析的准确性。方案
生物治疗药物中聚集体检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler 外设/附件 OpenLAB 软件
Agilent 1260 Infinity II Prime HPLC 液相色谱系统
检测仪器 1260 Infinity II Prime -
十二烷基硫酸钠毛细管电泳法 (CE-SDS) 是中国药典 2015 版附录收载的单克隆抗体药物纯度表征方法，其相对于聚丙烯酰胺凝胶电 泳法 (SDS-PAGE) 具有更快的分析速度、更好的分离度、更优越的重现性和更准确的定量，且更加自动化。CE-SDS 方法能够完成SDS-PAGE 方法不能完成的针对非糖基化重链的定量分析。 通过与商品化试剂盒的对比，证明该方法能够有效的分离还原单克隆抗体的非糖基化重链和重链，具有良好的重现性和定量准确性，且价格低廉，简便易行。方案
克隆抗体药物中纯度检测方案(毛细管电泳仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
Agilent 7100 毛细管电泳系统
检测仪器 7100 -
本应用简报介绍了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对生物治 疗样品中聚集体的定量分析。Protein A 亲和捕获在第一维中进行，而体积排 阻色谱在第二维中进行。多中心切割用于将样品从第一维转移到第二维。这 项技术能够在一次分析中完成整个表征，无需进行馏分收集和多次进样。方案
生物治疗样品中聚集体定量分析检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
安捷伦 1290 Infinity 二元液相色谱系统（1290 LC）
检测仪器 1290 Infinity 二元 -
在本研究中，我们提供一种新流程，结合快速色谱，利用两种规格的整体柱和高分辨Orbitrap质谱仪，对完整及还原利妥昔进行了分析，采用AIF，Multiplexed HCD自上而下的裂解，以及自下而上的分析方法进行序列验证。 即使抗体的上样量低至500pg,我们仍可以得到高质量的质谱图，该数据证明了LC-MS仪器的高灵敏度。此外，为了分析还原型单克隆抗体，我们采用色谱的方法将抗体的重链和轻链分开，设置不同的分辨率对其进行检测。 通过这个流程，我们可以测定完整抗体的分子量，对轻链和重链的氨基酸序列进行确认和验证，对该抗体不同糖基化形式的相对丰度进行鉴定和评价。方案
妥昔单克隆抗体中蛋白质检测方案(液质联用仪)
赛默飞Q Exactive Orbitrap LCMSMS系统
检测仪器 Q Exactive Orbitrap LCMSMS -
海能SH420F石墨消解仪
前处理设备 SH420F -
本文以半胱氨酸连接的抗体药物偶联物 (Antibody-Drug Conjugate, ADC) 为研究对象，使用连接 PLRP-S 反相液相色谱柱的 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统分离还原的轻链、重链和相对应连接药物的轻重链，并通过 Agilent 6530 高分辨率四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统对各个色谱峰进行鉴定。通过积分处理紫外吸收图谱中各 轻重链的峰面积百分比，结合各个峰的偶联药物数目，计算ADC的加权平均药物/抗体比率 (Drug to Antibody Ratio, DAR)。同时使用了安捷伦DAR 计算器 (Agilent DARCalculator)对质谱解卷积结果进行 DAR 值计算，所得结果与紫外吸收图谱计算所得结果相同。方案
抗体药物偶联物中药物/抗体比率检测方案(液质联用仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
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生物制药是生物技术产业中发展最为迅速的部分，以单克隆抗体药物为标志，目前全球已批准35个抗体药物上市，用于癌症、自身免疫、黄斑变性、血液病和感染治疗等。在生物制药的每个生产环节，产品的纯化和分析过程都至关重要。早期抗体的质量控制过程中，必须测定样品的效价、聚集体和电荷亚型。单克隆药物（MAb）产品中两个主要的杂质是电荷亚型单抗和单抗聚集体，这些副产物会产生与主产品不同的药效，有时会引起严重的副作用，如抗药性抗体的形成。蛋白聚体是在生产过程、纯化或者运输过程中产生（如温度，pH的影响）。本文讨论了采用一套HPLC系统（UltiMate3000钛系统）同时实现单克隆抗体的聚集体的分离和电荷亚型的分离。方案
单克隆抗体药物中生化蛋白样品及单克隆抗体分析中的应用检测方案(液相色谱仪)
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本文基于岛津LCMS-8060液质联用系统，通过Skyline设计，完成MRM通道的优化，完成抗体药物定量及定性肽段的初步筛选，进一步通过血浆样品的分析，筛选特异性的定量和定性肽段，完成LCMS方法结合nSMOL前处理技术定量分析血浆中贝伐单抗的方法开发工作。利用Skyline软件和nSMOL选择性酶解加速抗体药物定量分析方法的开发过程方案
人血浆中贝伐单抗药含量检测方案(液质联用仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
岛津三重四极杆液质谱联用仪LCMS-8050
检测仪器 LCMS-8050 -
本文向您介绍使用Skyline 软件和岛津LCMS-8050/8060 创建MRM方法，对生物样品中的单克隆抗体进行特异性检测的分析示例。岛津LCMS-8050/8060 和 Skyline 软件的组合使用，缩短定量分析方法的创建时间。方案
血液样品中单克隆抗体检测方案(液质联用仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
岛津LCMS-8060超快速三重四极液质联用仪
检测仪器 LCMS-8060 -
众所周知，凯氏定氮法所测定的氮包括有机态的氮以及无机态的氮。而对于一些针剂等需要测定真蛋白的样品而需要进行特殊的处理，将样品中的非蛋白氮进行测定，其差值则为真蛋白氮，从而可以计算得到真蛋白值，这里我们用到的是钨酸沉淀法。方案
针剂中蛋白含量检测方案(定氮仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
海能SH420F石墨消解仪
前处理设备 SH420F -
摘要 本应用简报介绍了 mAb 产品中亚 ppm 宿主细胞蛋白质杂质的定量分析方法。本工作流程采用 Agilent AssayMAP Bravo 平台、Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统和Agilent 6495C 三重四极杆 LC/MS 系统。方案
采用 Agilent 6495C 三重四极杆 LC/MS 系统定量分析宿主细胞蛋白质杂质
治疗类生物药品 | 含量测定
新型 6495D 三重四极杆液质联用系统
检测仪器 6495D
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