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【讨论】如何识别色谱柱的正反相及载体

液相色谱(LC)

  • 常听人说C-18柱是反相柱,我知道反向柱就是载体是非极性的柱,但如何一看色谱柱的型号就能识别呢?比如看到SB-CN,我就不知道如何识别了,大家给指点下啊
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  • pingpingzhu

    第1楼2008/06/01

    正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。
    正相色谱法 采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
    反相色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。
    随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的烷基脱落。有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。
    正相色谱法与反相色谱法比较表
    正相色谱法 反相色谱法
    固定相极性 高~中 中~低
    流动相极性 低~中 中~高
    组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出

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