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【求助】关于方法验证中准确度的一些问题。虚心求教。谢谢各位老师!

气相色谱(GC)

  • 首先先谢过热心的老师!

    小弟我最近在做药物A的残留溶剂乙醇的gc方法严整,其中牵涉到准确度的问题,我翻阅了一些资料,自己总结了以下观点,
    请各位老师指点一二:

    有两种做法:1.不加样回收率: 直接配置80% 100% 120%的溶液(我之前做的乙醇线性范围是0.25-1.00mg/ml,
    所以这里的80% 100% 120%也就分别是0.4 0.5 0.6mg/ml), 每个浓度我进样3次,由得到的响应面积值再根据之前所做
    的工作曲线方程计算出浓度,除以标准浓度得回收率。(以80%举例,我算出浓度为0.4076,那回收率=0.4076÷0.4×100%=101.9%)
    我想请问这样的做法和算法正确吗?有何不妥之处? 我感觉有重复测工作曲线的意思。。。

    2.加样回收率:同样配置80% 100% 120%的溶液,然后分别加入已知乙醇残留样的标准品药物A适量(要求总浓度在我的乙醇线性范围
    内), 每个浓度我同样进样3次,计算和刚刚一样。(以80%举例,假设标准品药物A的乙醇浓度为0.2,我计算出浓度为0.6076,那
    回收率1=(0.6076-0.2)÷0.4×100%=101.9% ,还是因该回收率2=0.6076÷0.6×100%=101.3%,
    或者回收率3=(0.6076-0.4)÷0.2×100%=103.8%

    这种做法步骤对吗?三种回收率的计算方法哪一个是正确的?还有标准品药物A哪里获得?(市面上不可能有卖这样的标准品啊,
    或者是我理解有误,只要是经过检测的药物A就可以了)


    最后一个问题:我想请问回收率结果有硬性规定吗?我单位的老师傅说要98-102% 如果是的话太难了,往往需要做好几针,
    然后再挑选符合的。但我看一些文献却不是的。请老师解答。


    一下子问了这么多,各位老师看了也累了吧,呵呵。不管你回复了没,再次向你表示感谢!
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  • jennysing

    第1楼2009/02/19

    第一种做法是在做精密度吧。我没有这样做过准确度。通常用的你说的第二种。在样品中加入高中低三个水平的标准,进行测定,计算回收率。
    不需要你说的药品标准,就用你的药物就可以。
    关于回收率的规定,并不是十分明确,根据不同的基质有不同的要求。基质简单95-105%,复杂一点的90-110%也没有问题,在含量低基质又很复杂的状况下80-120%也勉强能够接受

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  • liqinhuhu

    第2楼2009/02/19

    回这位老师,谢谢你!
    我写的第一种做法不是在做精密度....就是在做回收率...
    你说在样品中加入高中低三个水平的标准,进行测定,计算回收率.我想请问我不知道我样品中的乙醇含量 ,怎么计算?用我说的哪种方法计算?

    jennysing 发表:第一种做法是在做精密度吧。我没有这样做过准确度。通常用的你说的第二种。在样品中加入高中低三个水平的标准,进行测定,计算回收率。
    不需要你说的药品标准,就用你的药物就可以。
    关于回收率的规定,并不是十分明确,根据不同的基质有不同的要求。基质简单95-105%,复杂一点的90-110%也没有问题,在含量低基质又很复杂的状况下80-120%也勉强能够接受

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  • jennysing

    第3楼2009/02/19

    呵呵,老师谈不上。不过是探讨一下。
    我的确没听说过第一种确定准确度的方法,可能是孤陋寡闻。
    你的样品是肯定要测的,计算回收也是要减去你的样品本底的,你可以在你的线性范围内适当加标,保证最低加入量和最高加入量之间有一定的倍数差距。

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  • liqinhuhu

    第4楼2009/02/19

    谢谢!我才毕业不久 很菜。。。相信这里的朋友都能当我的老师。

    按你的说法 是不是只要有预先测过的样品便可? 如果是这样 ,假设我的样品残留是0.2mg/ml 以80%举例,我计算出浓度为0.6076,那
    回收率1=(0.6076-0.2)÷0.4×100%=101.9% ,
    还是因该回收率2=0.6076÷0.6×100%=101.3%,
    或者回收率3=(0.6076-0.4)÷0.2×100%=103.8%
    因该采用哪种算法 还是都不正确。。。谢谢大家!

    jennysing 发表:呵呵,老师谈不上。不过是探讨一下。
    我的确没听说过第一种确定准确度的方法,可能是孤陋寡闻。
    你的样品是肯定要测的,计算回收也是要减去你的样品本底的,你可以在你的线性范围内适当加标,保证最低加入量和最高加入量之间有一定的倍数差距。

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  • jennysing

    第5楼2009/02/20

    不太明白你的意思,呵呵。80%是什么呢?
    一般的回收率公式是=(加标后测定的浓度-样品本底的浓度)/加入的标准的浓度*100%

    liqinhuhu 发表:谢谢!我才毕业不久 很菜。。。相信这里的朋友都能当我的老师。

    按你的说法 是不是只要有预先测过的样品便可? 如果是这样 ,假设我的样品残留是0.2mg/ml 以80%举例,我计算出浓度为0.6076,那
    回收率1=(0.6076-0.2)÷0.4×100%=101.9% ,
    还是因该回收率2=0.6076÷0.6×100%=101.3%,
    或者回收率3=(0.6076-0.4)÷0.2×100%=103.8%
    因该采用哪种算法 还是都不正确。。。谢谢大家!

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  • 戈壁明珠

    第6楼2009/02/21

    应助达人

    回收率的高低和被测物的理化性质、添加浓度、样品基质的复杂性都有关系,所以不能要求回收一定要接近100%。

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  • happy水中月

    第7楼2009/02/21

    找一个本底样品,或者含残留很少的样品,测定一个结果A,然后添加已知量(B)的残留物质,用该本底和残留物质的混合物,一起按照样品处理的程序处理,最后测定结果C. 然后计算回收率=(C-A)/B*100%

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  • lordxia

    第8楼2009/02/21

    我来回答试试:
    确实有两种回收率的做法,你说的第一种是标样回收率,第二种是样品回收率,如果是做标准的话,两种方法的回收率都要做低、中、高三个浓度的。
    对于样品回收率,应该是回收率3的做法,用(测定值-加入标样量)/样品值;
    还有,对于样品回收率,是对含有低、中、高三个不同浓度的样品,加入类似浓度的标样进行计算,而不是只对一个浓度的样品加入三个不同浓度的标样。
    以上是我的理解,仅供参考,不对之处请各位专家指正!

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