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【讨论】HPLC 方法摸索

  • hupilan007
    2009/04/29
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:20积分状态:已解决
  • HPLC_1200_B: 14-Apr-2009 461336 AND 461337
    大家都知道HPLC方法说简单也简单,说难也难。就我所知的也不多,无外
    色谱柱的选择,流动相的选择以及样品前处理方法的不同.柱子我一般用C18,C8 的,耐酸的一般 Agilent zorbax SB C18,而其余的只要满足PH 2-8就可以了。超出范围就不是柱子问题了,该考虑流动相换缓冲液了。其实我真的不知道各种不同型号的柱子有什么不同。粒 径 小的当然柱效高,分离效果好些,但是压力往往高,对色谱柱要求也比较高,也就是费柱子,而粒径大的自然分离效果差了。象是键合相,什么十八烷基,氨基等,用是用过,但也搞不懂有什么太大差异。反正HPLC方法色谱柱的选择我是知道的不多。

村长 2009/05/07

建立一个方法首先得知道你的药分析物质的理化性质,例如pKa值,极性大小,是否容易分解,溶解性,在紫外有无吸收等等。然后再研究用什么方法,正相还是反相,流动相pH,加不加离子对或者缓冲盐......啊呀,需要考虑的太多了,具体问题具体分析,给你一本书,研究去吧 [img]https://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=148798]实用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法的建立[/url] [img]https://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=148797]实用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法的建立[/url]

fengxuemei 2009/05/07

还有本书: 实用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法的建立(第2版) 很经典的,资料中心有下载的,建议LZ好好看看,找不到也可以站内短信联系我~~~

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  • hupilan007

    第1楼2009/04/29

    流动相无外乙腈,甲醇与水配了,大多数物质都可以用它们分析了,如果有解离再换缓冲液,或者加甲酸,三氟乙酸什么的 流动相的选择在我看来就是这么简单而已。样品前处理相对可能就复杂一些了。有盐析,醇析,过滤,离心等等,搞不好就会影响方法的可靠性,准确性。反正摸方法真的我是外行,不知怎么搞,向各位高手求助,希望大家不吝赐教!

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  • 老多_小多

    第3楼2009/04/29

    确实是,条理再写好点
    都看不出你设悬赏的意图
    HPLC 方法摸索说的太笼统

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  • 知足常乐!

    第4楼2009/04/29

    在开发HPLC分析方法之前,首先要对被测物的一些性质进行了解
    液相方法无非就几点:1.检测器,可以利用物质的结构,确定选择什么样的检测器,如选择紫外,就可以用紫外分光光度计扫描最大波长
    2.柱子的选择,一般首选C18柱,特殊物质可以选用专用的柱子,如手性柱
    3.流动相,正如LZ所说,一般物质都可以用水和乙腈或者甲醇就可以了,但是有的时候分离效果不佳,可以选择用缓冲盐,调PH值,真假柱温等
    4.物质的浓度,可以根据仪器的灵敏度,选择合适的浓度

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  • hupilan007

    第5楼2009/04/29

    大家能否再说得详尽些呢。

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  • hupilan007

    第7楼2009/04/29

    的确,我电脑输不了中文,全靠复制粘贴了,没办法啊!

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  • abalone

    第8楼2009/04/29

    如果不是新药,很多方法可以查找文献参考

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  • 楚无伤

    第9楼2009/04/29

    楼主定义不明确呀
    如果单单只算HPLC上面的方法
    也不是这么简单的

    检测器的种类——紫外、视差、电化学等等?
    柱子的种类——C18、氨基柱、酶柱等等?
    流动相的种类——甲醇、乙腈、正己烷、二氯甲烷等等?
    流动相的组成——梯度、比例?

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  • 〓猪哥哥〓

    第10楼2009/04/29

    HPLC方法摸索不是很难,关键在于你在摸索的时候会碰到怎么摸索条件都不合适的时候,这时候才会有问题。其他的也都比较普遍。还应具体问题具体分析。

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