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【转帖】进样的溶剂效应

液相色谱(LC)

  • 此贴转自中国色谱网,感谢amian与lishaojing的辛勤工作。
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    样品溶剂效应

    很多因素可以导致峰形变差。样品溶液的组成与进样体积很可能就是导致此种现象的原因。

    问题
    色谱图上较早洗脱的峰扭曲变形或者开叉,与此同时较晚洗脱的峰则较为尖锐与对称,这些现象显示一个比较特殊的起因――样品溶液的溶剂很可能强于流动相。此种强溶剂效应的例子在图10-1A中可见。此处的样品溶液的溶剂是100%乙腈(100%的强溶剂),而流动相的组成则较弱,18%的乙腈与72%的水。第一个峰是开叉的,并且与第二个峰相比,明显地变宽了。当样品溶液的溶剂变成流动相时,所有的峰形都改善了,且变得尖锐。见图10-1B。

    解释

    当样品进样时,有可能出现峰展宽,最佳的样品溶液组成和体积将会保持在10%甚至更低,在这个例子里,当样品溶剂与流动相溶剂强度不同时,换句话来说,也就是样品未用流动相溶解,因此,有些样品分子溶解在强溶剂(100%ACE),并随强溶剂流过柱子,而有些则溶解在流动相中,从而导致峰分叉.

    当样品与流动相强度相差较小,进样影响也会小,第一个峰可能会宽于第二个峰,而当这种展宽导致必要的分离度降低时,这样情况应引起注意,在图10-2A中,使用一根短柱,和5UL进样,这与最佳进样体积4UL相近,用了极性更强的溶剂导致分离度明显的降低,从2.1降到1.5(如图10-2B),分离度为2或更大是评估一个完善方法的一个必要参数,也是每天方法的验证参数,1.5只是一个基本的分离度,任何一个方法或一根柱子都必需满足这个条件,当进样为一倍时,也就是10UL时,分离度更一步降低,此方法就不行了
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  • flyaway

    第1楼2009/05/06



    flyaway 发表:此贴转自中国色谱网,感谢amian与lishaojing的辛勤工作。
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  • lxj1206

    第2楼2009/05/06

    具体怎么解决呢?或者说如何把溶剂效应降到最低呢?
    毕竟针对不同组分的混标,为了得到较好的分离效果,流动相的比例也会变化,总不可能用这种比例的流动相去配制标样吧

    flyaway 发表:此贴转自中国色谱网,感谢amian与lishaojing的辛勤工作。
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    样品溶剂效应

    很多因素可以导致峰形变差。样品溶液的组成与进样体积很可能就是导致此种现象的原因。

    问题
    色谱图上较早洗脱的峰扭曲变形或者开叉,与此同时较晚洗脱的峰则较为尖锐与对称,这些现象显示一个比较特殊的起因――样品溶液的溶剂很可能强于流动相。此种强溶剂效应的例子在图10-1A中可见。此处的样品溶液的溶剂是100%乙腈(100%的强溶剂),而流动相的组成则较弱,18%的乙腈与72%的水。第一个峰是开叉的,并且与第二个峰相比,明显地变宽了。当样品溶液的溶剂变成流动相时,所有的峰形都改善了,且变得尖锐。见图10-1B。

    解释

    当样品进样时,有可能出现峰展宽,最佳的样品溶液组成和体积将会保持在10%甚至更低,在这个例子里,当样品溶剂与流动相溶剂强度不同时,换句话来说,也就是样品未用流动相溶解,因此,有些样品分子溶解在强溶剂(100%ACE),并随强溶剂流过柱子,而有些则溶解在流动相中,从而导致峰分叉.

    当样品与流动相强度相差较小,进样影响也会小,第一个峰可能会宽于第二个峰,而当这种展宽导致必要的分离度降低时,这样情况应引起注意,在图10-2A中,使用一根短柱,和5UL进样,这与最佳进样体积4UL相近,用了极性更强的溶剂导致分离度明显的降低,从2.1降到1.5(如图10-2B),分离度为2或更大是评估一个完善方法的一个必要参数,也是每天方法的验证参数,1.5只是一个基本的分离度,任何一个方法或一根柱子都必需满足这个条件,当进样为一倍时,也就是10UL时,分离度更一步降低,此方法就不行了

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  • 〓猪哥哥〓

    第3楼2009/05/06

    好好学习下。对于溶剂理论还没接触过

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  • 村长

    第4楼2009/05/07

    尽量用流动相去溶解样品,如果样品在流动相中溶解性差不得不用强溶剂溶解,那就尽量减少进样量。

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  • sally98

    第5楼2009/05/07

    如果是梯度洗脱的话,就用初始比例的流动相溶解样品。

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  • flyaway

    第6楼2009/05/08

    聪明!正解!

    ycsun2003 发表:尽量用流动相去溶解样品,如果样品在流动相中溶解性差不得不用强溶剂溶解,那就尽量减少进样量。

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  • fengxuemei

    第7楼2009/05/08

    感谢楼上的各位,很是受用~~~

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  • fengxuemei

    第8楼2009/05/08

    这是个问题啊?
    所以我们一般选择单纯用流动相的有机相来配制样品,但是这样峰型往往会不太理想,希望专家支援一下~~~

    lxj1206 发表:具体怎么解决呢?或者说如何把溶剂效应降到最低呢?
    毕竟针对不同组分的混标,为了得到较好的分离效果,流动相的比例也会变化,总不可能用这种比例的流动相去配制标样吧

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  • imokfe

    第10楼2009/05/18

    见识了

    谢谢搂住了

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