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【求助】不同波长下HPLC重现性问题

液相色谱(LC)

  • 在使用HPLC时,虽然在不是最大吸收波长时,保留时间是保持不变的~~
    但是我在不是最大吸收波长时,做了二次重新性特别不好,保留时间是不变的,但是纯度积分面积,一次85,一次45%,在最大吸收波长时是99%。那位大大可以给我解答下为什么??????
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  • 哇咔咔

    第1楼2009/06/17

    不在最大吸收波长,应该是考虑了该物质杂质的吸收波长而综合判定的。你在最大吸收波长的时候,主要杂质的吸收可能很小。会导致你归一化法的不准确性,重现性不好,是不是其他原因,色谱条件,积分参数,样品变化?
    要是用外标法测含量的话,就可以选最大吸收波长,

    aiyi313 发表:在使用HPLC时,虽然在不是最大吸收波长时,保留时间是保持不变的~~
    但是我在不是最大吸收波长时,做了二次重新性特别不好,保留时间是不变的,但是纯度积分面积,一次85,一次45%,在最大吸收波长时是99%。那位大大可以给我解答下为什么??????

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  • 老多_小多

    第2楼2009/06/17

    也许是重叠了杂质

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  • 知足常乐!

    第3楼2009/06/17

    仪器没有平衡好?检测器问题?样品不稳定?
    就算是不在最大吸收波长,含量也不会变化这么多啊

    aiyi313 发表:在使用HPLC时,虽然在不是最大吸收波长时,保留时间是保持不变的~~
    但是我在不是最大吸收波长时,做了二次重新性特别不好,保留时间是不变的,但是纯度积分面积,一次85,一次45%,在最大吸收波长时是99%。那位大大可以给我解答下为什么??????

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  • aiyi313

    第4楼2009/06/17

    我这里是用的VWD的检测器 这个样品还是比较稳定的~再说我在最大吸收波长时,重现性是特别的好的~·

    wenshaowei-2008 发表:仪器没有平衡好?检测器问题?样品不稳定?
    就算是不在最大吸收波长,含量也不会变化这么多啊

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  • 〓猪哥哥〓

    第5楼2009/06/17

    当不在最大吸收波长时,杂质的吸收也比较大。原来的干扰峰由于波长的更换所产生的信号也加大了。所以纯度下降。
    不同波长下,积分面积肯定不一样的。

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  • tengy1973

    第6楼2009/07/05

    同意!因为我曾做过一次样品检测,因为忘记改变波长,而作出了含量很小的结果,,改回正常检测波长,结果也正常了。

    03yx2 发表:当不在最大吸收波长时,杂质的吸收也比较大。原来的干扰峰由于波长的更换所产生的信号也加大了。所以纯度下降。
    不同波长下,积分面积肯定不一样的。

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