初学者&九点虎
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2试验部分
2.1仪器和试剂
2.1.1仪器:UV-2550型紫外可见分光光度计(岛津有限公司)
2.1.2试剂:
标准亚硝酸盐溶液:GBW(E)0802230504水中亚硝酸盐-氮,浓度:100mg•mL-1,并逐级稀释为0.9857μg•mL-1的标准贮备液;硫酸锌溶液:535g•L-1;亚铁氰化钾溶液:172g•L-1;盐酸-氨水缓冲溶液:pH9.6~9.7;显色液1:盐酸:水= 450:550(V:V)盐酸溶液;显色液2:5g•L-1磺胺溶液;显色液3:1g•L-1萘胺盐酸盐溶液。
试验中所用试剂均为分析纯,所用水为去离子水。
2.2标准溶液的配置
标准曲线的绘制:取 6个50mL容量瓶,分别加入浓度为0.9857μg•mL-1的亚硝酸钠标准贮备液0,0.5,1.0,2.0,5.0,10.0mL,加水至20mL,并做空白试验,然后依次加入3mL显色液1,2.5mL显色液2,混合均匀后,静置5min,加1mL显色液3, 静置5min,用去离子水定容至刻度,此溶液浓度分别为0.00、 9.86、19.72、59.14、98.56、197.14μg• L-1。静置5min后于538nm处,用1cm比色皿进行测定。
2.3试验过程
2.3.1吸收光谱曲线的绘制
在光谱模式下,测定标准系列的光谱图,仪器条件见表1。
表1 仪器条件
波长扫描范围/nm 420~650
光谱带宽/nm 0.5
采样间隔 0.5
扫描速度 中速
在此仪器条件下,扫描出标准系列的吸收光谱图,见图1。
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2.3.2标准曲线的绘制
在光度测定模式下,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线,见图2。工作曲线方程为A= 0.0011C - 0.0005,相关系数r=0.9999。
图2 亚硝酸盐标准曲线
2.2样品测定
2.2.1 样品前处理
将酸牛乳样品混合均匀后,称70g左右样品,按顺序加入35mL硫酸锌溶液,35mL亚铁氰化钾溶液,50mL盐酸-氨水缓冲溶液,每加一种试剂充分混合,用去离子水定容于250mL容量瓶中,静置40min,用定性中速滤纸过滤后收集滤液。
2.2.2样品测定
移取20mL滤液于50mL容量瓶中,加3mL显色液1,2.5mL 显色液2,摇匀,静置5min;加1mL显色液3,静置5min,定容后静置5min,上机。同时移取20mL滤液于50mL容量瓶中做为参比溶液,加水定容至刻度,摇匀后静置,与样品同测,测定结果见表1
表2 样品测定数据
名称 质量(g)国标测定结果(mg•kg-1) 扣背景测定结果(mg•kg-1)
酸牛乳1 71.4 0.44 0.07
酸牛乳2 72.8 0.46 0.10
酸牛乳3 70.6 0.53 0.14
酸牛乳4 72.3 0.61 0.18